кальретинин что это такое

Кальретинин, также известный как кальбиндин 2 (ранее 29 кДа кальбиндин), это кальций-связывающий белок участвует в кальциевая сигнализация. [5] У человека белок кальретинин кодируется CALB2 ген. [6] [7]

Содержание

Функция

Этот ген кодирует внутриклеточный кальций-связывающий белок, принадлежащий к тропонин С надсемейство. Члены этого семейства белков имеют шесть EF-рука домены, которые связывают кальций. Этот белок играет роль в различных клеточных функциях, включая нацеливание сообщений и внутриклеточную буферизацию кальция. [6]

Кальретинин в большом количестве экспрессируется в нейронах, включая сетчатку (отсюда и название). [5] и корковый интернейроны. [8] Экспрессия была обнаружена в разных нейронах, чем у аналогичных нейронов. витамин D-зависимый кальций-связывающий белок, кальбиндин-28кДа. [5]

Кальретинин играет важную роль в качестве модулятора возбудимости нейронов, включая индукцию долгосрочное потенцирование. [9] Было высказано предположение, что потеря экспрессии кальретинина в интернейронах гиппокампа имеет отношение к височной эпилепсии. [10]

Он выражен в ряде других мест, включая волосяные фолликулы. [11]

Клиническое значение

Кальретинин является диагностическим маркером некоторых заболеваний человека, в том числе: Болезнь Гиршпрунга и некоторые виды рака.

Мезотелиома

С помощью иммуногистохимия, кальретинин может проявляться как в доброкачественных мезотелий и в злокачественных мезотелиома [12] [13] и может использоваться, чтобы помочь различать разные опухоли легких. [14] Антитела к кальретинину также можно использовать для различения разных типов Опухоль головного мозга, демонстрируя только те, у кого нейронный скорее, чем глиальный, дифференциация. [15] Кроме того, была продемонстрирована важная функция кальретинина в клеточных линиях мезотелиомы. in vitro и может быть интересной мишенью для терапевтических подходов. [16]

Болезнь Гиршпрунга

В Болезнь Гиршпрунга, кальретинин иммуногистохимия предлагает дополнительную диагностическую ценность в образцах с недостаточным количеством подслизистая основа и редко видели ганглий клетки. Присутствие ганглиозных клеток постоянно коррелировало с кальретинин-положительными тонкими нервными волокнами в собственная пластинка, muscularis mucosae и поверхностная подслизистая основа. Эти кальретинин-положительные тонкие нейрофибриллы отсутствуют в аганглионарных сегментах кишечник и в областях без ганглиозных клеток от стыка нормального с больным прямая кишка. Кальретинин сильно экспрессируется в подслизистой оболочке и субсерозный нервные стволы в ганглиозном сегменте. Не наблюдается экспрессии кальретинина в нервных стволах остальной части аганглионарного сегмента. Он слабо выражен в толстых нервных стволах из областей без ганглиозных клеток. Слабая позитивность толстых подслизистых и субсерозных нервов при отсутствии ганглиозных клеток и кальретинин-положительных нервных фибрилл характерна для соединения прямой кишки с аганглиозом и нормальной. [17]

Источник

Медицинские интернет-конференции

Языки

Иммуногистохимические маркеры прогноза развития рецидива неинвазивных уротелиальных карцином

Цмокалюк Е.Н., Маслякова Г.Н.

Резюме

Проведенный анализ результатов иммуногистохимического исследования 13 моноклональных антител в биопсийном материале 34 больных с раком мочевого пузыря позволяет выявить наиболее значимые иммуногистохимические маркеры предрасположенности к рецидивированию у пациентов с поверхностной формой рака мочевого пузыря.

Ключевые слова

Статья

Несмотря на постоянное усовершенствование методов диагностики и лечения поверхностных форм уротелиальной карциномы к сожалению, не удается сколь нибудь значимо снизить процент рецидивов данных форм рака мочевого пузыря. По данным клинических рекомендаций Европейской ассоциации урологов (2010) прогрессирование опухоли при Та развивается в 6-20% случаев, при Т1 в 27- 48% при любой степени дифференцировки опухолевой ткани.

Большинство исследователей Американской и Европейской урологических ассоциаций, считают ТУР золотым стандартом лечения поверхностного рака мочевого пузыря [1, 9]. Однако, процент рецидивирования поверхностного РМП после выполнения только ТУР МП достаточно высок и составляет в среднем от 51% до 95% [27, Аль-Шукри С.Х. с соавт., 1997; Тарасов Н.И., 2000; Rajala P. et al., 1999; Tolley D.A. et al., 1996], при этом примерно 50% рецидивов возникают в течение 1-го года наблюдения.

Причинами частого рецидивирования поверхностных форм уротелиальной карциномы при органосохраняющей терапии большинство ученых считают следующие:

Западными исследователями было доказано, что высокодифференцированные неинвазивные папиллярные карциномы (рТа) обладают меньшим потенциалом прогрессирования, чем низкодифференцированные с инвазией в субэпителиальную мышечную ткань (рТ1). Вероятность мышечной инвазии в 2 раза меньше у рТа, чем у рТ1 опухолей и составляет 9% и 18% соответственно. Степень дифференцировки также является очень важной характеристикой опухоли. Доказано, что G1 опухоли прогрессируют в 6% случаев, в то время как у G2 опухолей потенциал прогрессирования больше в 5 раз и составляет 30% [22]. При наблюдении за больными в течение 20 лет риск прогрессирования для pTaG1 и pT1G3 был еще выше – 14% и 45% соответственно, при этом рецидивы выявлялись примерно в 50% случаев вне зависимости от степени злокачественности опухоли [19].

С данными результатами исследований согласны и отечественные ученые, которые также считают, что каждый последующий рецидив обладает большим потенциалом злокачественности, следовательно, имеет тенденцию к снижению дифференцировки и к инвазии в мышечный слой (Матвеев Б.П., 2001).

Хорошо известен тот факт, что течение заболевания, опухолевая прогрессия в виде возникновения рецидивов у пациентов с одной и той же клинической стадией и морфологической формой рака часто бывает различным. Поэтому, чтобы понять причины рецидивирования поверхностных форм уротелиального рака и с целью определения потенциала клеток, составляющих опухолевый рецидив, возникла необходимость в проведении дополнительного изучения с помощью иммуногистохимических маркеров.

В отечественной и зарубежной литературе существует много публикаций, в которых единодушно указывается, что уровень экспрессии генов-супрессоров, антигенов пролиферативной активности прямо коррелирует с опухолевой прогрессией и рецидивированием (7, 13). Однако, индексы экспрессии других групп маркеров в мышечнонеинвазивных формах рака (маркеры апоптоза, цитокератины и др.) среди исследователей имеют очень противоречивые результаты.(10)

Следует указать и тот факт, что своевременная молекулярная характеристика рецидивирующей опухоли позволяла бы отбирать больных не только для органосохранного лечения, но и проводить своевременную радикальную цистэктомию пациентам с высоким потенциалом рецидивирования, продлевая им тем самым жизнь.

Все вышесказанное определило цель нашего исследования.

Цель исследования: Выявить наиболее значимые иммуногистохимические маркеры предрасположенности к рецидивированию у пациентов с поверхностной формой рака мочевого пузыря.

Материалы и методы

Материалом для исследования послужили операционный и биопсийный материал 106 пациентов с новообразованиями мочевого пузыря, проходивших лечение в НИИ «Фундаментальной и клинической уронефрологии» ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И.Разумовского Минздрава России. С помощью обзорных методов окрашивания диагноз уротелиального рака был поставлен 94 пациентам. Остальные 12 пациентов составили группу сравнения. Операционный и биопсийный материал фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина и заливали в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм, окрашенные гематоксилин-эозином, были подвергнуты обзорному морфологическому анализу, при котором стадию рака определяли в соответствии с классификацией TNM, а степень дифференцировки опухолевых клеток оценивали в соответствии с рекомендациями ВОЗ, 2004. Микроскопическое изучение препаратов было проведено с применением бинокулярного микроскопа «Micros MC100» при 400-кратном увеличении.

Иммуногистохимические реакции проводили на серийных парафиновых срезах (5мкм), используя стрептавидин-биотиновый метод. В качестве детекционной системы применяли систему LSAB2 System, HRP (K0675), Dako, в качестве хромогена – диаминобензидин (Dako).

Иммуногистохимическое исследование 13 маркеров было проведено на биопсийном и операционном материале. Все используемые моноклональные антитела были разделенны на группы по функциональной значимости:

Интенсивность реакций с антигенами, локализованными в цитоплазме (цитокератины 7,8,13,17,18,19) и на мембранах клеток (EGFR), оценивали полуколичественным способом по балльной шкале от 0 до 3, учитывая выраженность реакции и ее локализацию: 0 – отсутствие реакции, 1 – слабая реакция, 2 – умеренная реакция, 3 – сильная реакция.

Результаты реакций с антигенами, имеющими ядерную локализацию (PCNA, Ki67, p53, p63, bcl-2), оценивали по системе подсчета histochemical score. Система подсчета включает в себя интенсивность иммуногистохимической окраски по 3-балльной шкале и долю (%) окрашенных клеток и представляет собой сумму произведений процентов, отражающих долю клеток с различной интенсивностью окраски на балл, соответствующий интенсивности реакции. Интенсивность окраски 0 – нет окрашивания, 1 – слабое окрашивание, 2 – умеренное окрашивание, 3 – сильное окрашивание.

Формула подсчета следующая: histochemical score = ∑ P (i) х I, где i – интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0 до 3; P (i) – процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью. Максимальное значение гистосчета должно соответствовать 300.

Статистический анализ проводили с использованием пакета программ статистической обработки результатов SSPS 13.0 for Windows.

Результаты

Из 104 человек с диагнозом уротелиального рака были отобраны больные у которых РМП имел рецидивирующее течение – 34 человека.

При сравнительной характеристике клинических групп Та иТ1 необходимо отметить, что процент рецидивирующих опухолей резко возрастает с 34% в группе Та до 73% в группе Т1. Практически в половине процентов случаев (44%) рецидивы наблюдались у пациентов, первичная опухоль которых имела мультицентрический характер поражения слизистой мочевого пузыря.

В группе Та все 100% опухолей, которые рецидивировали в последующем, были высокодифференцированными (G1). Разнообразная картина наблюдается среди пациентов группы Т1: преобладали опухоли с высокой степенью злокачественности (G2,3), высокодифференцированные первичные опухоли (G1) наблюдались в 2,5 раза реже.

В группе пациентов Т1 среди больных с рецидивирующими опухолями отмечается существенный рост процента клеток с положительной экспрессией по сравнению с группой Та: среднее количество клеток с положительной экспрессией Ki67 в Та – 4%, в Т1 – 17,5%. Кроме того, необходимо отметить, что раковые клетки с интенсивной иммуногистохимической реакцией маркера Ki67 и р53 появляются только в тех случаях, когда уротелиальная карцинома имела в последующем рецидив. Аналогичная тенденция наблюдается в показателях положительной экспрессии и у остальных ядерных маркеров.

Рис. 1. Уротелиальный рак с инвазией в собственную пластинку слизистой оболочки мочевого пузыря. Умеренная и высокая экспрессия Кi-67 в ядрах уротелия.

Необходимо отметить особенности экспрессии Р53 среди пациентов группы Т1: позитивная экспрессия наблюдалась только у больных в первичной опухоли с рецидивами.

Рис. 2. Умеренная и выраженная экспрессия маркера Р53 в клетках уротелиальной карциномы с инвазией в собственную пластинку слизистой мочевого пузыря.

PCNA в обеих группах показал высокий процент экспрессии без существенных различий среди пациентов с рецидивами и без рецидивов.

При иммуногистохимической реакции на антигены, локализованные в цитоплазме, было установлено, что их экспрессия во всех исследованных группах больных является положительной. Достоверно значимых различий между группами больных по показателям иммуногистохимических реакций с цитокератинами (СК7, СК8, СК10/13, СК17, СК18, СК19) и рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) не установлено.

Маркер Bcl2 не показал достоверной разницы в экспрессии ни в одной из изучаемых групп.

Выводы

Таким образом, проведенные исследования 13 моноклональных иммуногистохимических антител позволили сделать следующие выводы:

Источник

Calretinin, рolyclonal, rabbit

Антитело к кальретинину эффективно для дифференциации мезотелиомы от аденокарцином легочного и прочего происхождения. Также показана польза антитела к кальретинину при дифференциации опухолей коры надпочечников от феохромоцитом.

Цена предоставляется по запросу

Наши преимущества:

Только качественные
официальные поставки

Минимально возможные
сроки поставок

Доставка по всей России с соблюдением температурного режима

Полный пакет документов

На данный момент мы сотрудничаем с ведущими зарубежными производителями лабораторных реактивов. Нашими клиентами являются как негосударственные, так и государственных учреждения, в том числе медицинские организации Москвы и других городов России. Для постоянных клиентов предусмотрена система скидок.

2003–2021 © ООО «Микротесты в биологии, медицине и ветеринарии». Официальный дистрибьютор ведущих производителей.
+7 (495) 969-98-26

Источник

Онкомаркеры: для чего необходим анализ?

К сожалению, статистика неумолима. И на сегодняшний день уровень смертности от онкологических заболеваний достаточно высок. Так, в течение последних 100 лет онкопатология поднялась с 10-го места на 2-ое, отдав «первенство» заболеваниям сердечно-сосудистой системы. Всемирная Организация Здравоохранения предполагает, что смертность от рака до 2030 года увеличиться на 45%. И эти цифры заставляют задуматься. В связи с этим хотим сегодня поговорить с Вами о ранней диагностике онкологических проблем, а именно об анализах на онкомаркеры.

Онкомаркеры – что это?

Онкомаркеры представляют собой специфические вещества, как правило, белковой природы, которые вырабатываются в организме человека больного раком. Так, данный анализ позволяет обнаружить опасные изменения, происходящие в организме. Стоит отметить, что онкомаркеры могут секретироваться, как самими клетками опухоли, так и быть реакцией организма на наличие опухоли.

Для чего назначается пациенту анализ на онкомаркеры? Его цели.

Наиболее распространенные онкомаркеры. Их расшифровка.

Важно отметить, что количество онкомаркеров, содержащихся в крови, может незначительно увеличиться при развитии кист, доброкачественных опухолей, инфекционных или воспалительных заболеваниях. Поэтому поставить тот или иной диагноз может только специалист после качественной диагностики.

Анализы на онкомаркеры в Харькове

В лечебно-диагностическом центре «ЦМЭИ» Вы можете сдать следующие анализы онкологической панели:

Кроме того, у нас Вы можете воспользоваться пакетными предложениями для женщин и мужчин, которые позволят Вам сохранить собственное время и денежные средства. К тому же в нашей клинике Вы можете получить консультацию грамотного врача-онколога. Запись по телефонам: +380 (572) 65-18-75; +380 (57) 703-62-24; +38 (073) 036 60 56. Будем рады помочь!

Источник

Болезнь Гиршпрунга у детей

Общая информация

Краткое описание

Общероссийская общественная организация «Российская Ассоциация детских хирургов»

Клинические рекомендации
БОЛЕЗНЬ ГИРШПРУНГА У ДЕТЕЙ

Год утверждения (частота пересмотра): 2019 (пересмотр каждые 3 года)

Автоматизация клиники: быстро и недорого!

— Подключено 300 клиник из 4 стран

Автоматизация клиники: быстро и недорого!

Мне интересно! Свяжитесь со мной

Классификация

При любой форме БГ в описательной части целесообразно указывать уровень распространения аганглиоза. Существование ультракороткой формы БГ является сомнительным и выделение ее как самостоятельной нозологической единицы в настоящее время нецелесообразно.
В отечественных учебниках по проктологии представлены классификации, сыгравшие важную роль на этапах изучения течения заболевания и освоения хирургических методов его лечения. Предложенные авторами различные формы проявления и стадии течения БГ были связаны, прежде всего, с поздней диагностикой заболевания и другими подходами к срокам и этапности хирургического лечения. Тем не менее, знание этих классификаций необходимо для понимания возможных изменений в состоянии ребенка при поздней диагностике БГ.

Этиология и патогенез

Эпидемиология

Частота заболевания в России до настоящего времени не уточнена. По данным Росстата частота впервые выявленных всех врожденных пороков развития (ВПР) у детей до 14 лет в 2015 году составила 277,9 тысяч (1154,8 на 100 тысяч детей) [3]. БГ не входит в перечень 21 нозологии (ВПР) обязательного учета в Российской Федерации, поэтому уточнить истинную частоту заболевания в настоящее время не представляется возможным. Отечественными коллегами представлены цифры по отдельным регионам. В Москве ежегодно оперируют 150 детей с болезнью Гиршпрунга [4]. По данным зарубежной литературы частота порока составляет 1 : 4,417; 1 : 5000 живорожденных, у мальчиков в четыре раза чаще, чем у девочек [5, 6]. По данным Европейской ассоциации регистров врожденных пороков развития (2011-2015 гг.) частота БГ составляет 404 на 10000 живорожденных [7].

Диагностика

Диагностика

Клинические признаки БГ представлены в таблице

Чаще ГАЭК проявляется:
— тяжелой диареей
— нарушением периферического кровообращения
— летаргией
— дилатацией кишечных петель (Frykman, P. K., Kim, S., Wester, T., Nordenskjöld, A., Kawaguchi, A., Hui, T. T. & HAEC Collaborative Research Group. (2018). Critical evaluation of the Hirschsprung-associated enterocolitis (HAEC) score: A multicenter study of 116 children with Hirschsprung disease. Journal of pediatric surgery, 53(4), 708-717)

Причина возникновения до конца не изучена, состояние зачастую требует интенсивной терапии, перевода ребенка на полное или частичное парентеральное питание, декомпрессии кишечника [4].

Рисунок 1
Ирригограмма с сульфатом бария (боковая проекция, заполнение) ребенка 8 месяцев с короткой формой БГ
1. зона относительного сужения кишки (аганглиоз)
2. «Переходная» зона
3. Расширенные вышележащие отделы кишки

Оценка метода исследования [13]:
-чувствительность 91 %
-специфичность 94 %

Остальные маркеры, такие как S100, нейрон-специфическая енолаза, синптофизин и др. не показывают высокой точности диагностики и возможность их применения исследуется в настоящее время. Интраоперационная биопсия для уточнения зоны резекции и состояния нервного аппарата низводимой кишки предпочтительна, однако требует соответствующей координации работы операционного и патологоанатомического блоков лечебной организации.
В диагностике БГ возможно исследование слизистой оболочки на предмет гипертрофии АХЭ-положительных нервных волокон и повышение активности АХЭ в мышечной и собственной пластинках слизистой оболочки [15]. Однако полученные данные являются косвенными, в связи с чем биопсия только слизистой оболочки кишки (например, при эндоскопии) не рекомендована. Рекомендуемая толщина подслизистого слоя должна быть не менее 1/3 биоптата. В случае отсутствия подслизистого слоя в материале требуется повторение биопсии [5].
Биопсия с захватом подслизистого слоя (щипковая, аспирационная биопсия) является альтернативой полнослойной биопсии, но предназначена в основном для имуногистохимических исследований и мало применима при классической окраске гематоксилин-эозином. [16].
Межмышечное ганглионарное сплетение может быть визуализировано только при полнослойной биопсии. При щипковой биопсии с захватом подслизистого слоя при наличии хотя бы одного ганглия в подслизистом сплетении диагноз аганглиоз не может быть поставлен [17].
Исследования биоптатов с захватом подслизистого слоя включает оценку сплетений Мейсснера на предмет количества ганглиев и АХЭ-позитивные нервные волокна. БГ может быть установлена при обнаружении гипертрофии нервных волокон в мышечной пластинке слизистой оболочки кишки у новорожденного и в собственной пластинке слизистой у детей старше 3 месяцев.
Тест на активность тканевой АХЭ применим только при биопсии прямой и сигмовидной кишок, так как активность парасиматичеких волокон S2-S4 уменьшается в проксимальных отделах и отсутствует выше левого угла colon.

Лечение

Лечение

Уровень убедительности рекомендаций I (уровень достоверности доказательств – А)
Комментарий. Хирургическое лечение детей с БГ с первой операции экстраректальной ректосигмоидэктомии с первичным анастомозом O. Swenson претерпело изменения 22. Основными радикальными оперативными вмешательствами являются классические операции Свенсона, Соаве и Дюамеля, суть которых состоит в резекции аганглионарного участка кишки с лапаротомией и восстановлении непрерывности кишки. Возможно формирование колоректального анастомоза отсрочено (методика А.И. Ленюшкина). В настоящее время используют миниинвазивные варианты хирургического лечения – трансанальную методику Де ла Торре-Мандрагон-Ортега, трансанальную методику Свенсона и лапароскопическую методику Джорджсона. Рекомендовано владеть несколькими методиками операций, выбирая метод индивидуально для каждого ребенка. Если детские хирурги не обладают достаточным опытом или обеспечением для проведения хирургического лечения БГ, ребенок должен быть направлен в медицинскую организацию третьего уровня. При невозможности своевременной транспортировки пациента и риске развития осложнений БГ рекомендовано наложение кишечной стомы.
Показания для наложения превентивной кишечной стомы:
— тяжелое состояние ребенка, декомпенсация функции ЖКТ
— невозможность точно определить «переходную» зону
— невозможность адекватно подготовить кишечник для радикальной операции
— отсутствие достаточного опыта радикальных операций в медицинской организации.
Наложение колостомы (энтеростомы) осуществляется на участок здоровой кишки выше переходной зоны, возможно использование предварительной лапароскопии для ревизии брюшной полости.
Используют технику петлевой или раздельной колостомии (энтеростомии) с обязательным выведением дистального сегмента кишки. Полнослойная биопсия приводящего и отводящего отдела должна быть выполнена в обязательном порядке для морфологического подтверждения диагноза и оценки состояния интактной кишки. При трудно различимой «переходной» зоне (например, у новорождённых детей) хорошая функция стомы после операции может косвенно демонстрировать правильность выбора уровня будущей резекции. В случае слишком «низкого» наложения стомы и выведения аганглионарного участка после операции отмечается обструктивный синдром, стома нередко стенозируется, требуется повторная операция и стомирование проксимального участка кишки.
Радикальное вмешательство выполняется по стабилизации состоянии ребенка. При тотальных формах БГ и формировании илеоректального анастомоза в большинстве случаев выполняют «защитную» илеостомию.
Нередко классическая БГ сочетается с нейрональной дисплазией кишки выше зоны аганглиоза (патология подслизистых мейсснеровских сплетений). Данный диагноз подтверждается при гистологическом исследовании приводящего сегмента стомы. Тактика при нейрональной дисплазии не разработана и должна быть ориентирована на функцию кишки [24].

Принципы основных видов операций при БГ:

В настоящее время с учетом данных мультицентровых исследований, систематических обзоров и метаанализа

Медицинская реабилитация

Реабилитация

Реабилитация детей с БГ после операции составляет важную часть комплексного лечения и зачастую требует индивидуального подхода, так как неудовлетворительные функциональные результаты и снижение качества жизни пациентов до сих пор нередки как в России, так и за рубежом [4]

Таблица Данные метаанализа 16 валидных исследований, 820 пациентов, оценка отдаленных результатов от 6 месяцев до 6 лет после операции) (Пури 2016)

В разграничении причин сохраняющегося запора следует выделять: возможное наличие стеноза или стриктуры колоректального анастомоза, остаточную зону аганглиоза, гипертонус внутреннего анального сфинктера и/или ахалазию, нарушение моторики низведенных отделов кишки (в том числе на фоне дисганглиоза), функциональные нарушения дефекации [26].

Информация

Источники и литература

Информация

болезнь Гиршпрунга
дети
аганглиоз кишечника

Список сокращений

Приложение А1. Состав Рабочей группы

Члены Рабочей группы не имеют конфликта интересов

Приложение А2. Методология разработки клинических рекомендаций

Целевая аудитория данных клинических рекомендаций
1. врачи-детские хирурги
2. врачи-педиатры

Класс рекомендаций

Таблица П1 Уровни убедительности рекомендаций

Таблица П2
Уровни достоверности доказательств

Приложение Б. Алгоритмы ведения пациента

Источник

• ← Что такое драйвер?
• кошки в подвале многоквартирного дома что делать →