маркеры пролиферации p16 и ki 67 что это
Маркеры пролиферации p16 и ki 67 что это
Выявление атипичных клеток плоского эпителия шейки матки, экспрессирующих одновременно белок р16 и маркер пролиферации Ki67, указывает на нарушение регуляции клеточного деления и обеспечивает более точную диагностику онкопатологии высокой степени тяжести. Иммуноцитохимическое исследование проводится в целях обнаружения предраковых изменений и рака шейки матки у женщин, а также позволяет дифференцировать вирусную составляющую дисплазии шейки матки.
Мазок по Папаниколау, Пап-тест, мазок на онкоцитологию, белок р16; p16 INK4a ; онкопротеин.
Синонимы английские
Pap smear, Papanicolaou Smear; Cervical Smear; Cervical Oncocytology, р16 protein; p16 INK4a ; oncoprotein; immunocytochemical study.
Метод жидкостной цитологии + иммуноцитохимический метод.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок смешанный из цервикального канала и поверхности шейки матки.
Общая информация об исследовании
Рак шейки матки (РШМ) по распространенности занимает 3-е место среди всех злокачественных опухолей у женщин (после рака молочной железы и рака толстой кишки). Частота инвазивного рака шейки матки в мире составляет 15-25 на 100 000 женщин. Новообразования шейки матки возникают в основном у женщин среднего возраста (35-55 лет), редко диагностируются моложе 20 лет и в 20 % случаев выявляются в возрасте старше 65 лет.
5-летняя выживаемость при локализованном (местном, in situ) раке шейки матки равна 88 %, в то время как выживаемость при распространенном раке не превышает 13 %.
К факторам риска развития рака шейки матки относится инфицирование вирусом папилломы человека (онкогенные серотипы HPV 16, HPV 18, HPV 31, HPV 33, HPV 45 и др.), курение, хламидийная или герпетическая инфекция, хронические воспалительные гинекологические заболевания, длительное применение противозачаточных препаратов, случаи рака шейки матки в семье, раннее начало половой жизни, частая смена половых партнеров, недостаточное поступление с пищей витаминов А и С, иммунодефициты и ВИЧ-инфекция.
Согласно международным рекомендациям, все женщины должны проходить скрининг (досимптомное обследование) на рак шейки матки через 3 года после начала половой жизни, но не позже 21 года. Начиная с 30-летнего возраста пациентки, у которых было 3 последовательных отрицательных результата при исследовании мазков из шейки матки, могут проходить скрининг каждые 2-3 года. Женщины с факторами риска (инфицирование вирусом папилломы человека, иммунодефицитные состояния) должны продолжать ежегодный скрининг. Женщины 65 лет и старше с 3 и более нормальными результатами анализа мазков из шейки матки за последние 10 лет могут не участвовать в скрининге. Переболевшим раком шейки матки, имеющим папиллома-вирусную инфекцию или ослабленную иммунную систему, желательно продолжать скрининг. Женщины, перенесшие удаление матки и шейки матки, могут не сдавать этот анализ, если операция была выполнена не из-за рака или предракового состояния шейки матки. Те, у кого операция была только на матку, без удаления шейки, должны продолжать участие в скрининге.
Жидкостная цитология – инновационный метод цитологического исследования, идеальный для диагностирования неоплазий слизистой оболочки канала и влагалищной части маточной шейки; применяется при подозрении у пациентки на рак или дисплазию. Благодаря нему можно обнаружить рак на самых ранних стадиях развития.
После взятия мазка на онкоцитологию биоматериал помещается в жидкую среду. С помощью специальной центрифуги происходит «отмывание» клеток (цитопрепаратов), которые концентрируются в одном месте и образуют ровный слой. При этом заключение врача-цитолога будет более точным и информативным, нежели при обычной цитологии, когда материал, взятый для исследования, сразу же наносится на медицинское стекло для анализов.
Преимуществом ПАП-теста является высокая четкость изображения клеток. При использовании этой технологии полученный материал смешивается со специальным раствором, который механически отделяет клетки эпителия от загрязнений. В результате число ложно-отрицательных результатов значительно сокращается.
Цитологическое исследование материала из шейки матки и цервикального канала, окрашенного по методу Папаниколау с соблюдением методики проведения теста и условий подготовки к анализу, позволяет с высокой чувствительностью и достоверностью выявить атипичные клетки в материале, предраковые состояния (дисплазию, интраэпителиальную неоплазию шейки матки). Чаще всего исследуют биоматериал, полученный при помощи специальной цитощетки из двух точек (эпителий эндоцервикса и экзоцервикса). В мазок должен попасть материал из зоны трансформации, так как около 90 % неопластических состояний исходят из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и только 10 % – из цилиндрического. При данном исследовании также могут быть выявлены признаки наличия инфекции, патологии эндоцервикса и эндометрия.
Иммуноцитохимический метод – это метод молекулярной иммунологической диагностики, позволяющий идентифицировать клеточные и тканевые молекулы-антигены в результате их связывания с антителами и формирования комплекса «антиген-антитело». Данный метод позволяет проводить иммунологический анализ цитологического материала в условиях сохранения морфологии клеток.
В современной диагностике рака шейки матки иммуноцитохимическое исследование позволяет выявлять белок р16 (p16 INK 4 a ), а точнее его экспрессию на поверхности эпителиальных клеток. Исследованию могут быть подвергнуты отдельные мазки из шеечного канала (эндоцервикса) или с наружной поверхности шейки матки (экзоцервикса) или смешанный мазок, полученный при нанесении на одно предметное стекло биоматериала из эндоцервикса и экзоцервикса.
Белок р16 – это клеточный протеин, участвующий в регуляции клеточного цикла и являющийся ингибитором активности циклинзависимой киназы CDK4/6. В норме киназа неактивна и клеточная пролиферация инактивирована за счет наличия прочной связи фактора транскрипции E2F с белком-супрессором рRb. Белок р16 осуществляет контроль разобщения комплекса E2F-Rb, не допуская пролиферации клетки. В нормально функционирующих клетках синтез р16 сдерживается по механизму обратной связи и, следовательно, концентрация данного белка в нормальной клетке чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией. Онкобелок Е7 ВПЧ с высоким онкогенным риском посредством внутриклеточных механизмов приводит к разобщению комплекса E2F-рRb, активации CDK4/6 киназы, а впоследствии стимулирует чрезмерную клеточную пролиферацию. При этом повышается экспрессия белка р16, что проявляется положительной иммуноцитохимической реакцией мазков клеток.
Иммуноцитохимическое исследование онкобелка р16 позволяет достоверно дифференцировать опухолевую и неопухолевую дисплазии, а также обладает высокой диагностической чувствительностью. Известно, что экспрессия данного белка связана со слабовыраженной (CINI), умеренной (CINII) и резковыраженной дисплазией (CINIII) и внутриэпителиальным раком шейки матки. Он практически не обнаруживается в клетках плоского эпителия без признаков дисплазии (0-2 % случаев).
Таким образом, выявление экспрессии белка р16 INK 4 a иммуноцитохимическим методом в дополнение к рутинному методу жидкостной цитологии и окраски мазков по Папаниколау позволяет повысить чувствительность теста, выявлять персистирующую папиллома-вирусную инфекцию до появления морфологических изменений, с наибольшей точностью обнаружить риск развития рака шейки матки, своевременно поставить диагноз и назначить требуемое лечение.
Ki-67 – антиген раковой опухоли, который можно обнаружить в клетке, когда она делится, но в фазе покоя клеточного цикла он не определяется. Эта особенность Ki-67-маркера служит полезным индикатором прогноза поведения злокачественной опухоли. Тест проводится на образце ткани, полученном из опухоли в результате биопсии или оперативным путем. Тест Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях. Но большая доля исследований по определению его значения как маркера опухоли приходится на этот вид рака. Высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.
Скрининг и ранняя диагностика предраковых состояний и начальных стадий рака шейки матки позволяют своевременно провести эффективное лечение и предотвратить опасные последствия.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Жидкостная цитология. Исследование соскоба шейки матки и цервикального канала (окрашивание по Папаниколау)
С учетом классификации по системе Бетесда «The 2001 Bethesda System terminology«
1. Количество материала
2. Интерпретация результатов:
При выявлении минимальных изменений или атипичных клеток неясного значения рекомендовано провести обследование на онкогенные серотипы вируса папилломы человека.
Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67
Что может влиять на результат?
У девушек моложе 20 лет возможны ложноположительные результаты в связи с наличием изменений эпителия на фоне транзиторных гормональных нарушений.
Кто назначает исследование?
Маркеры пролиферации p16 и ki 67 что это
ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли;
Белок p16 INK4a ; онкопротеин; гистологическое исследование, иммуногистохимическое исследование (ИГХ).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Образец ткани (биоптат) образования шейки матки.
Общая информация об исследовании
Дисплазия и рак шейки матки занимают значительное место в структуре онкологических заболеваний среди женщин. Дисплазия представляет собой изменение эпителия влагалищной части шейки матки и появление в нем клеток с признаками атипии. Считается предраковым заболеванием, но при своевременном обнаружении и лечении процесс обратим и не приводит к развитию рака шейки матки. Рак шейки матки является достаточно распространенной и важной проблемой среди всех онкологических заболеваний у женщин. Доказано, что в развитии данной патологии играет роль наличие некоторых типов вируса папилломы человека (ВПЧ), способных при определенных условиях вызывать озлокачествление дисплазии (или других предраковых заболеваний).
На современном этапе диагностики рака шейки матки одним из достоверных методов исследования является комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование по экспрессии p16INK4a, дающее наиболее объективную и полную оценку происходящим процессам.
p16INK4a – это белок, который обладает функцией регулирования клеточного цикла и предотвращает процесс бесконтрольного деления клеток. При определенных условиях вирус папилломы человека (ВПЧ) способен встраиваться в геном клетки и оказывать влияние на процесс ее деления, что приводит к усиленной пролиферации. При этом в опухолевых клетках, процесс деления которых происходит уже под контролем измененного генома, происходит реактивное увеличение количества белка p16INK4a. Таким образом, в опухолевых клетках увеличивается экспрессия белка p16INK4a, что сигнализирует о встраивании ВПЧ в геном клетки и ее перерождении в опухолевый процесс.
Гистологическое исследование, являющееся первым этапом комплексной диагностики, представляет собой морфологическое описание патологического процесса, в том числе определение «злокачественности». Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) выполняется вторым этапом и позволяет определить «пролиферативный потенциал» новообразования, т.е. возможность злокачественного перерождения клеток, а также спрогнозировать течение уже имеющейся опухоли. ИГХ проводится путем добавления к исследуемому материалу специальных антител, которые связываются с белком p16INK4a. Затем происходит качественная оценка образовавшегося комплекса антиген-антитело и делается вывод об экспрессии белка p16INK4a на поверхности клеток.
Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.
Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.
Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.
Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы «антиген-антитело», доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.
Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
1) Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.
2) Повышение экспрессии p16INK4a:
Результат представлен в виде морфологического описания исследуемой ткани после окрашивания специальными красителями и характера изменений. Значения зависят от типа опухоли, анамнеза, проведенного лечения и других факторов. Окончательную интерпретацию проводит врач в каждом конкретном случае.
Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
Лабораторные маркеры рака шейки матки
Кто назначает исследование?
Цитологическое и иммуноцитохимическое исследование экспрессии белков p16INK4a и Ki-67 в мазках слизистой шейки матки (Cytology and p16 and Ki-67 immunocytochemistry test in cervical mucosa smears)
Своевременное распознавание и корректное лечение предраковых процессов шейки матки (дисплазии или цервикальной интраэпителиальной неоплазии) – важная задача современной онкогинекологии.
Цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN – cervical intraepithelial neoplasia) является предраковым поражением, имеющим три степени выраженности (отражающие стадии развития изменений): дисплазия слабой степени (CIN1), дисплазия умеренной степени (CIN2) и дисплазия тяжелой степени (CIN3). При отсутствии лечения CIN2 или CIN3 (в совокупности называемые CIN2+) в 75% случаев прогрессируют в рак шейки матки (РШМ).
Согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2013 года [12], альтернативой стандартной стратегии последовательной цитологической, кольпоскопической и гистологической диагностики является использование подхода «скрининг-лечение», в котором решение о необходимости начать лечение основывается на результатах скрининговых тестов и принимается в кратчайшие сроки или, в идеале, сразу после получения положительного результата скрининговых тестов. Раннее начало терапии приводит не только к полному выздоровлению в ряде случаев, но и к репродуктивной, психоэмоциональной и социальной реабилитации женщин. Такой подход считают более оправданным, если в локальных условиях не утверждена или не функционирует с должным качеством стандартная стратегия последовательных диагностических исследований.
Большинство ВПЧ-инфекций относится к транзиторным, и они разрешаются спонтанно в течение 1-2 лет [3, 8]. Базовым методом первичного скрининга рака шейки матки, согласно ВОЗ, является выявление вируса папилломы человека (ВПЧ) методом ПЦР. Однако с помощью ВПЧ-тестирования нельзя дифференцировать доброкачественные преходящие инфекции и клинически значимые инфекции, приводящие к внедрению ДНК ВПЧ в геном клеток эпителия шейки матки и развитию предраковых изменений. Для выявления женщин с повышенным риском развития рака шейки матки среди ВПЧ-инфицированных пациенток только ПЦР-тестирования недостаточно.
Дополнительную информацию при скрининге может дать проведение иммуноцитохимического исследования с определением ко-экпрессии белков p16 и Ki-67, которое рекомендовано как подтверждающий метод выявленных при скрининге изменений и определения степени выраженности дисплазии, в том числе у женщин, инфицированных онкогенными типами ВПЧ (16/18) до направления на кольпоскопию и проведения биопсийного исследования.
Белки р16 и KI-67 являются белками-регуляторами клеточного цикла. Выявление одновременной совместной экспрессии р16 и маркера Ki-67 в одной и той же клетке указывает на нарушение регуляции клеточного цикла, связанное с ВПЧ-трансформацией и развитием дисплазии клеток эпителия шейки матки [9], и является дополнительным диагностическим инструментом, позволяющим объективизировать выявление дисплазии слабой степени выраженности (LSIL). Метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью в сравнении с рутинным цитологическим скринингом [7, 11]. Следует помнить, что воспроизводимость метода ко-выявления белка р 16 и Ki-67 в цитологических мазках прямо коррелирует с адекватностью взятого биоматериала, строгим соблюдением правил подготовки к проведению исследования. Клинический диагноз дисплазии эпителия шейки матки должен быть подтвержден результатом биопсийного исследования.
Использование ИГХ-исследования с Ki 67 и p16/INK4a в дополнение к стандартному гистологическому исследованию позволяет объективизировать первичный диагноз степени CIN, а также выделить больных с высоким и низким риском развития тяжелых повреждений.
Особенно это актуально для группы CIN2, наиболее проблематичной в плане как гистологической оценки, так и тактики клинического ведения пациенток. Использование ИГХ при первичной диагностике будет способствовать: улучшению информативности множественной прицельной и петлевой эксцизионной биопсий; снижению числа рецидивов ввиду неадекватного лечения; устранению необоснованного применения такого травматичного метода, как конизация (особенно у женщин детородного возраста).
Литература
Конечной целью цитологического исследования материала из цервикального канала и с шейки матки является выявление рака шейки матки и предшествующих ему состояний. Важно получить информативный биоматериал, свободный от крови, слизи, воспалительного экссудата и лубрикантов, так как это влияет на чувствительность метода.
При осуществлении взятия материала для цитологического исследования из шейки матки следует соблюдать определенные правила.
Литература
Литература
Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Результат предоставляют в виде цитологического ответа согласно классификации Бетесда. Описательный ответ с указанием наличия клеток, в которых определяется ко-экспрессия антител к Ki-67 и белку p16INK4a.
Маркеры пролиферации р16 и кі-67
Маркеры пролиферации р16 и кі-67
Ваш город: Киев Вы можете выбрать другой город.
Markers of Proliferation p16 and
Вирус папилломы человека (ВПЧ) признан этиологическим фактором развития рака шейки матки, поэтому выявление данного вируса свидетельствует о наличии риска развития данной онкологической патологии или уже наличии злокачественной трансформации эпителия шейки матки. Это положено в основу мировых алгоритмов использования в рамках цервикального скрининга совместно с цитологическим исследованием для сортировки всех аномальных мазков и в рамках первичного скрининга. Значительно повышая диагностическую чувствительность цервикального скрининга (до 98%), имеет недостаточно высокую диагностическую специфичность, что обусловлено, прежде всего, высокой распространенностью данного вируса, особенно в молодом возрасте. Вирус папилломы человека, попадая в клетки эпителия шейки матки, сначала находится в эписомальной форме — стадии, когда происходит репликация вируса, способствующая распространению инфекции. Именно на этой стадии возможна самоэлиминация вируса благодаря особенностям защитных сил организма. При неблагоприятных факторах вирус продолжает персистировать в клетках и переходит в интегрированную форму — это стадия злокачественной трансформации клеток эпителия и развития РШМ, которая связана с интеграцией вируса в геном клетки и экспрессией онкобелков Е6, Е7, которые обеспечивают неконтролируемый рост клеток. Именно эта стадия является предраковой, и все методы, позволяющие ее определить, являются очень важными в скрининге РШМ — на данном этапе лечение путем удаления пораженного участка обеспечивает предупреждение развития РШМ. Одним из методов выявления данной стадии является определение маркеров пролиферации, которые отражают экспрессию онкобелков.
Это определение:
Определение в одной клетке маркеров пролиферации отражает наличие нарушения контроля над клеточным делением и позволяет выявить клетки, инфицированные ВПЧ с онкогенной трансформацией.
Диагностические вопросы, которые решает определение маркеров пролиферации:
Общие правила подготовки к взятию материала для цитологического исследования у женщин (атипичные клетки, мазок на стекле, цитологическое исследование , кольпоцитологическое исследование):
Кольпоцитологическое исследование
Назоцитограмма (риноцитограмма)
Общие правила подготовки к взятию материала для цитологического исследования у женщин (атипичные клетки, мазок на стекле, цитологическое исследование , кольпоцитологическое исследование):
Кольпоцитологическое исследование
Назоцитограмма (риноцитограмма)
Цитологическое исследование эпителия шейки матки
Рак шейки матки (РШМ) занимает второе место по распространенности среди онкологических заболеваний в мире и первое место среди причин женской смертности от рака в развивающихся странах. В настоящее время считается доказанной связь инфицирования вирусом папилломы человека (ВПЧ) и риском развития РШМ, ВПЧ обнаруживается в 99% случаев онкологической патологии шейки матки (ШМ). Считается, что для реализации онкогенного потенциала вирусу необходимо, в среднем, 5–7 лет — это время диагностических возможностей выявления предраковых стадий и своевременного лечения, что является основой предотвращения развития РШМ. Выделяют два основных гистологических типа РШМ: аденокарцинома (10%) и плоскоклеточный рак (90%), в последнее время отмечается рост процента аденокарцином в структуре рака шейки матки (до 20%), что связано с более злокачественным течением и сложностями своевременного выявления (прежде всего, цитологического исследования).
На сегодняшний день в мире разработаны меры первичной (вакцинация против ВПЧ) и вторичной профилактики, которые могут привести, при правильной организации, к полной ликвидации данного злокачественного новообразования.
Лабораторные методы составляют основу цервикального скрининга и постоянно совершенствуются. Основополагающим методом проведения цервикального скрининга на протяжении многих лет в мире признано цитологическое исследование, которое со времени его предложения Дж. Папаниколау в 1943 г. позволило в некоторых странах мира снизить заболеваемость и смертность на 50%-70%. Он предложил использовать цитологию как метод скрининга РШМ и разработал метод окрашивания, который до настоящего времени связывают с его именем — окраска по Папаниколау. — цитологическое исследование препаратов, окрашенных по методу Папаниколау — основной скрининговый метод выявления предраковых заболеваний и рака шейки матки.
Однако широкое использование цитологического мазка на стекле показало и имеющиеся недостатки — достаточно высокий процент получения некачественных мазков, что требовало повторного забора материала, сложности для просмотра мазка и возможности рассмотреть все структурные элементы клетки. Диагностическая чувствительность, которая обеспечивала бы своевременную выявляемость предраковых состояний, оставляла желать лучшего: в среднем, колебалась около 60%. Это привело к поиску более эффективных методов получения мазка. Жидкостной цитологический анализ (Liquid Based Cytology — LBC) был разработан и предложен в США в 1996 г. Данный метод основан на том, что собранные клетки эпителия шейки матки помещают в специальную жидкую среду, которая обеспечивает сохранение клеток, длительное хранение полученного материала и проведение дополнительных методов тестирования — выявление вируса папилломы человека, маркеров пролиферации р16/. На сегодняшний день данные две разновидности цитологического исследования: традиционная цитология (мазок на стекле) и цитология на жидкой основе () могут быть использованы в рамках цервикального скрининга РШМ.
Цитологические исследования мазков, взятых с поверхности шейки матки (зоны трансформации и цервикального канала), позволяют оценить клеточный состав эпителия и выявить атипичные клетки. При направлении на данное исследование необходимо в направлении указать: предварительный диагноз, дату последних месячных или длительность менопаузы, операции и даты их проведения, прием гормональной терапии (КОК, ЗГТ).
Одним из важных факторов получения качественного материала для исследования является строгое соблюдение правил подготовки к взятию материала из шейки матки: оптимально проводить исследование на 10–20 день менструального цикла, желательно при отсутствии воспалительных процессов в шейке матки, не раннее 24 часов после любых внутривагинальных вмешательств (осмотр гинеколога, кольпоскопия, применение местных препаратов, орошений), коитуса. Оптимально повторное исследование проводить не раннее чем через 3 недели после предыдущего цитологического исследования и 3 месяцев после хирургических вмешательств на шейке матки. Взятие материала осуществляется с 2 точек: зона трансформации и цервикальный канал. Материал должен быть взят специальными инструментами: щетка Валлаха/, цитобраш (щетка эндоцервикальная). Для адекватной оценки состояния эпителия шейки матки требуется наличие в мазке не менее 10000 хорошо визуализируемых клеток плоского эпителия (для традиционной цитологии) и 5000 для жидкостной цитологии, не менее 10 клеток цилиндрического эпителия цервикального канала и/или метаплазированного эпителия переходной зоны, что свидетельствует о правильном заборе материала для цитологического исследования. Особенно это важно при взятии материала у женщин с 3 типом зоны трансформации (когда зона первичного стыка эпителия располагается глубоко в цервикальном канале) в соответствии с требованиями международной классификации The Bathesda System (TBS, 2001). Неинформативным считается мазок, в котором мало клеток плоского эпителия, материал занимает менее 10% поверхности предметного стекла, более 75% клеточного состава лизировано или плохо просматривается (преобладает детрит, лейкоциты, «толстый» мазок), нет цилиндрического и/или метаплазированого эпителия в мазках женщин репродуктивного возраста. Небрежно выполненный мазок (большое количество слизи, крови, влагалищных выделений; малая площадь мазка; толстый мазок) влияет на качество интерпретации результата исследования.
В случае традиционной цитологии (на стекле) материал наносится на предметное стекло, предварительно промаркированное, и высушивается на воздухе. В случае (цитология на жидкостной основе) материал (две щеточки) помещается в специальный контейнер с консервирующей жидкостью. Затем в лаборатории с помощью специального оборудования готовят стандартизированные тонкослойные препараты, что позволяет снизить процент некачественных мазков, получаемых при традиционном нанесении на стекло, а цитологу — качественно оценить клеточный материал. Кроме того, оставшийся материал в дальнейшем может быть использован для проведения (выявление маркеров инфицирования ВПЧ), цитохимических исследований (p16, и других маркеров пролиферации), молекулярных методов выявления урогенитальных инфекций.
Полученные мазки окрашиваются по методу Папаниколау и оцениваются цитологом с выдачей заключения: в случае традиционной цитологии — по Папаниколау с указанием степени дисплазии, в случае на жидкостной основе — по системе Bethesda (TBS, 2001 г.). Корреляции между различными системами классификации представлены в таблице.