Тест выявляет антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Эти антитела присутствуют в крови у больных сифилисом.
Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Возбудителем сифилиса является Treponema pallidum (бледная трепонема), бактерия из семейства спирохет.
Сифилис – венерическое заболевание: наиболее часто он передается половым путем. Кроме того, возможно заражение через кровь (например, при совместном использовании шприцев, бритв и пр.), плода от матери или бытовым путем (очень редко).
В международной классификации болезней выделяют врождённый, ранний и поздний сифилис, а также неуточненные формы. В медицинской литературе используются понятия первичный, вторичный и третичный сифилис.
Инкубационный период начинается с момента заражения и длится до первых симптомов (твердого шанкра) в среднем 21 день (от 10 до 90 дней).
Первичный сифилис – стадия с возникновения твердого шанкра до появления сыпи. Твердый шанкр – это язвочка, которая может появляться в том месте, где возбудитель проник в организм (обычно на половых органах). Он не болит и исчезает (без лечения) через 2-6 недель. Также на этой же стадии иногда увеличиваются лимфоузлы. В первое время заболевший человек остается серонегативным (т. е. в его крови еще нет антител против сифилиса).
Вторичный сифилис. Примерно через 4-8 недель после появления шанкра проявляются новые симптомы: сыпь и общее недомогание, температура, головная боль и др. Возможны и более тяжелые проявления.
Затем признаки сифилиса исчезают и заболевание переходит в латентную фазу. При этом возбудитель все же не покидает организм, поэтому при ослаблении иммунитета могут возникать рецидивы болезни. Их симптомы совпадают с проявлениями вторичного сифилиса.
Бывает, что сифилис так и остается в латентной форме. Но в ряде случаев, если человек не лечится, с годами развивается третичный сифилис. При этом поражаются различные органы и ткани: нервная и сердечно-сосудистая система, кости, суставы и др.
Для диагностики сифилиса часто используют серологические тесты (основанные на выявлении антител). Все виды анализов можно разделить на две группы: трепонемные и нетрепонемные тесты. Анализ на сифилис RPR относится к нетрепонемным.
Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против самих бактерий T. Pallidum, например сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) или сифилис РИФ (реакция иммунофлуоресценции).
Посредством нетрепонемных тестов выявляют антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Они появляются в организме человека со стадии первичного сифилиса (примерно через неделю после возникновения твердого шанкра). При нетрепонемных методах анализа на сифилис не различают тип антител (IgG, IgM или др.), а определяют суммарный ответ. К таким исследованиям относят микрореакции преципитации: RPR, VDRL и др.
При первичном и вторичном сифилисе чувствительность нетрепонемных тестов высокая (в случае RPR: 86 % при первичном, 100 % при вторичном), а чем выше чувствительность метода, тем больше вероятность, что тест выявит болезнь. Соответственно, если человек болен сифилисом, то результат теста со 100-процентной чувствительностью точно будет положительным.
Однако при использовании нетрепонемных тестов возможен и ложноположительный результат (выявление антител, несмотря на то что человек не болен сифилисом). Дело в том, что антитела против кардиолипина возникают не только при сифилисе, но и при некоторых других заболеваниях.
Поэтому при диагностике сифилиса нетрепонемный тест должен быть подтвержден с помощью более специфичного трепонемного.
У нетрепонемных тестов есть еще одна особенность. Антитела против кардиолипина появляются в острой фазе болезни. Поэтому, когда человек выздоравливает, их уровень снижается, так что по нему можно судить об успешности лечения.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Окончательное решение о постановке диагноза зависит от результата других тестов (трепонемных).
Положительный результат должен быть подтвержден с помощью специфических трепонемных тестов.
Что означают результаты теста, который сдают повторно (после курса лечения)?
Что может влиять на результат?
Ложноположительные результаты могут быть:
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, инфекционист, венеролог.
Микрореакция преципитации (МР) на сифилис Rapid Plasma Reagin (RPR)
Что такое микрореакция преципитации
Количественная микрореакция преципитации Проводится методом серийного разведения исследуемой сыворотки крови.Титром преципитинов считают последнее разведение плазмы или сыворотки крови,где обнаружен преципитат.
Когда применяется микрореакция преципитации
Скрининг на сифилис Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на микрореакции преципитации.Скринингу на сифилис подвергаются:
Диагностика сифилиса Для диагностики сифилиса применяются комбинация количественной модификации микрореакции преципитации и трепонемных тестов на сифилис.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:
Контроль за лечением сифилиса Так как к моменту снятия с учета леченного больного сифилисом микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном обычно негативируется, а позитивные специфические реакции (РИТ, РИФ, ИФА, РПГА.) могут наблюдаться долго после окончания лечения (поэтому эти тесты не могут служить критерием излеченности) микрореакция преципитации является основным тестом для установления критерия излеченности сифилиса.
Снижение титров нетрепонемных тестов в 4 и более раза в течении года после лечения подверждает эффективность проведенной терапии сифилиса и является критерием его излеченности( Приказ Минздрава РФ № 87 от 26.03.01 г,МЗ РФ Приказ от 25 июля 2003 г. N 327,Рекомендации CDC (USA) 2006)
Как проводится микрореакция преципитации
Материал для исследования: кровь из пальца,венозная кровь,спинномозговая жидкость.Взятие крови желательно производить натощак.
Схема микрореакции преципитации Для проведения реакции используется классический VDRL-антиген (кардиолипин+лецитин+холестерин) с добавлением частиц угля для визуальной оценки результатов.теста.Исследуемая сыворотка крови перемешивается на стекле с антигеном.Если в сыворотке содержатся реагиновые антитела то образуются чёрные хлопья (флоккулянты), являющиеся признаком положительной реакции. При отсутствии реагиновых антител в сыворотке образования хлопьев (флоккуляции) не происходит.
Как оценивается микрореакция преципитации
Микрореакция становиться положительной в среднем через 4-5 недель после инфицирования.По мере развития сифилитической инфекции титры ее нарастают,при скрытом и позднем сифилисе количество антител уменьшается и микрореакция может быть оценена как слабоположительная или сомнительня,а иногда при третичном сифилисе и отрицательная.
Наиболее часто в мировой венерологии,а последнее время и в России результаты микрореакции оценивает совместно с трепонемными тестами РИФ и РПГА
Для выявления заболеваний используются различные методы, в том числе лабораторные. Микрореакция крови — это тип теста при диагностике сифилиса для выявления повреждения клеток.
Цель микрореакции крови
Этот тест не является специфическим тестом, так как он не предназначен для обнаружения возбудителя. Разрушение клеток может происходить и при других заболеваниях. Поэтому, если результаты теста положительные, следует провести другие лабораторные исследования.
Что выявляет анализ
ЗППП вызываются различными патогенами. Когда они попадают в организм, иммунная система реагирует увеличением синтеза веществ, которые должны с ними бороться. В ответ на размножение патогена вырабатываются связывающиеся с ним антитела. Антител должно быть столько же, сколько бактерий.
Борясь с трепонемой, бледный или другой возбудитель разрушает мембрану собственных клеток. Эти остатки тоже нужно удалить, и антитело на это отреагирует.
Тест показывает наличие этих компонентов, их комплексов, антител и антигенов. Каждый из них можно количественно оценить.
Виды исследования
Все неспецифические тесты делятся на две большие категории: макро- и микрореакции. Первый выполняется без дополнительного оборудования и оценивается визуально. Для второго нужен микроскоп с большим увеличением.
Электронная микроскопия позволяет идентифицировать поврежденные клетки без использования реагента.
Существует несколько видов тестов на микрореакцию крови:
Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.
Суть анализа в том, что кровь пациента помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить раствор концентрата. При наличии возбудителя жидкость окрашивается.
Во втором методе сыворотка крови исследуется под микроскопом; никаких дополнительных веществ не используется. Для получения количественного значения сыворотку многократно разводят, а затем отправляют в микроскоп, где лаборант записывает количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.
Показания к проведению исследования
Из-за простоты теста и отсутствия необходимости в дорогостоящих реагентах микрореакция осаждения используется в больших популяциях, чаще всего для рутинного скрининга.
Во время лечения, чтобы контролировать эффективность назначенной терапии, обследование проводится несколько раз.
Количественный тест на реакцию показан людям с симптомами патологии, детям больных родителей, а также при генитальных язвах. Тест также необходим для подтверждения диагноза после предварительных анализов или при наличии у пациента других венерических заболеваний.
Подготовка
Для получения достоверного результата необходимо соблюдать правила сдачи крови. Следует учесть несколько важных моментов.
Чтобы не спровоцировать выброс излишка гормонов, субъект должен отказаться от значительной физической активности перед сдачей крови, курением, употреблением алкоголя накануне, употреблением жирной пищи.
Забор крови проводится натощак, так как липиды будут появляться в виде пленки на верхней части пробирки и могут исказить результат. Последний прием пищи должен быть около 19:00 накануне вечером.
Забор крови для исследования
Для проведения микрореакции необходимо собрать капиллярную кровь, т. е. Из пальца. Его центрифугируют, т.е. сгусток удаляется из формальных элементов, а плазма остается. Дополнительно берется кровь из вены. Если не удается собрать, подходит спинномозговая жидкость.
Биологический материал осаждается, и плазма или сыворотка смешиваются с антигеном. При этом оценивается реакция. Медицинский работник должен следить за изменением цвета жидкости.
Сколько годен анализ на микрореакцию крови
Венозная кровь показывает следы патогена в течение 3-4 недель после заражения. Срок действия теста зависит от ее цели и положений, применимых в данном терапевтическом учреждении.
Расшифровка результата
Говоря о том, что происходит — крови Microsment, следует также упомянуть, как результаты расшифрованы. Это может предложить негативный, положительный или сомнительный результат.
Иногда найден ложный положительный или ложный отрицательный результат. Причины этого явления будут обсуждаться ниже.
Положительный результат
Эта реакция наблюдается после обнаружения хлопьев на слайде. Это означает, что сыворотка содержит антитела, которые были произведены против фрагментов антигенов или поврежденных клеток.
Результат «+» можно наблюдать в течение длительного времени даже после лечения, поскольку кровь нужно много времени для удаления всех фрагментов трепона и остальных поврежденных клеток. Но звание антигена будет иметь небольшое значение.
Положительная реакция может указывать на наличие сочувствия пациента, сервера, остаточных эффектов после терапии. Поддельные положительные результаты также могут возникнуть.
Отрицательный результат
Негативная реакция наблюдается, когда на слайде нет изменений, нет хлопьев. Это указывает на отсутствие заболевания или что он уже находится на продвинутой стадии.
В некоторых случаях реакция выполняется слишком рано, когда нет антител или фракция антитела настолько мала, что результат не может быть оценен как положительный. Это ложная негативная реакция.
Пациент успокаивается, считает, что он не болен, и инфекция учится, когда развивается клиническая картина.
Ложноположительный итог
Испытание материала может продемонстрировать наличие небольшого осадка, то есть небольшое количество антител. Этот результат получается, если вы не будете соблюдать правила сбора хранения или материала, если используются нестерильные материалы или если правила препарата нарушены. Надежные результаты получаются только тогда, когда все рекомендации уважаются перед тестированием.
Тест также подозревается в присутствии определенных заболеваний или условий, пациента которого могут не знать, или которые могут скрыться:
Этот метод теста, если он положительно, не означает, что диафрагма была подтверждена. Это только общее базовое исследование, которое будет объяснено. Реакция может продемонстрировать наличие антитела на других патогенах.
Чтобы подтвердить диагноз, необходимо выполнить тесты трекональных испытаний — ELISA или RIA — на основе комплекса антиген-антител. Они позволяют наличию трепонемы, результатом его эксплуатации и следов его деятельности.
Таким образом, тест Microrcement обнаруживает наличие антител против Treponem, но оно не специфично. Используется для изучения широкой популяции и позволяет выявлять здоровых людей и тех, которые требуют дополнительных, более продвинутых исследований.
Микрореакция на сифилис – лабораторное исследование, выполняемое с целью подтверждения или исключения присутствия в крови антител к бледной трепонеме. Такой анализ называют реакцией микропреципитации (МР), реакцией быстрых плазменных реагинов (RPR).
Существует разновидность такой реакции – ее называют микроскопическим исследованием VRDL, выполняемым с помощью световой микроскопии.
Реакцией микропреципитации это исследование называют потому, как при положительном ее результате происходит выпадение в осадок (преципитация) хлопьев (это и есть комплекс «антиген-антитело»).
Как проводится
Микрореакция на сифилис проводится путем анализа сыворотки крови.
Исследование основано на связывании специфического комплекса «антиген-антитело».
В роли антигена в данном случае выступает кардиолипиновый антиген, антител – липопротеины разрушающихся под действием бледных трепонем тканей организма и, возможно, компоненты клеточной оболочки возбудителя.
Следует иметь в виду, что микрореакция на сифилис не может использоваться с целью подтверждения болезни. Это исследование является лишь отборочным, так как разрушением тканей сопровождается не только сифилис.
Также и целый ряд других заболеваний (системные коллагенозы, туберкулез и т.д.).
Поэтому положительная микрореакция на сифилис может наблюдаться, в том числе, и в этих случаях. Такой результат исследования не может являться подтверждением наличия сифилитической инфекции. Он лишь служит сигналом для проведения дополнительных уточняющих анализов.
Положительная реакция
МР – серологическое исследование, используемое с целью массового скрининга населения на сифилис. Его проводят при постановке на учет по беременности, в ходе медосмотров работников здравоохранения, образования, общественного питания.
Также перед стационарным лечением и операцией, у доноров крови и трансплантируемых органов.
Кроме того, МР незаменима для быстрой диагностики сифилиса у людей, близко контактирующих с сифилитическими больными.
Также у тех, чей половой партнер заражен сифилисом.
Реакцию микропреципитации проводят у всех пациентов с язвенными, эрозивными, папулезными высыпаниями на половых органах.
Необходим такой анализ и с целью контроля зараженности после незащищенных половых контактов со случайными партнерами. Это неспецифический, нетрепонемный тест, поэтому подходит он лишь для первоначальной, экспресс-диагностики инфекции.
При положительном результате проводятся специфические трепонемные серореакции (ИФА, РПГА).
Позволяющие точно верифицировать диагноз и подтвердить заболевание.
Микрореакция на сифилис позволяет диагностировать не только качественно (на присутствие антител к трепонеме), но и количественно – определять титр антител и интенсивность течения заболевания.
Отрицательная реакция
Отрицательная микрореакция на сифилис означает, что в крови пациента отсутствуют антитела к бледной трепонеме и заболевания нет.
МР – исследование, которое используют с целью оценки эффективности лечения сифилиса.
По окончании курса специфической медикаментозной терапии проводится микрореакция.
При ее отрицательном результате делается вывод об успешности и эффективности терапии.
При положительном – терапия продолжается, возможно, меняется ее тактика и выбор препаратов.
Использовать специфические трепонемные тесты для контроля излеченности сифилисом нецелесообразно.
Так как они могут оставаться положительными на протяжении всей жизни пациентов, даже при их давнем выздоровлении.
Сдавать кровь на МР следует утром натощак, кровь берут из вены.
За день до этого следует воздержаться от употребления алкоголя, жирной, жареной и тяжелой пищи.
Микрореакция (МР, МРП) на сифилис: что это, когда проводится?
Виды исследования
Все неспецифические исследования можно разделить на две большие категории: макро- и микрореакции. Первая осуществляется без дополнительного оборудования, оценивается визуально. Вторая требует оборудования в виде микроскопа высокой степени увеличения.
Электронная микроскопия позволяет выявить разрушенные клетки без использования реактива.
Различают несколько типов анализа крови на микрореакцию:
Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.
Суть проведения анализа в том, что кровь больного помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить концентрат раствора. При наличии возбудителя происходит окрашивание жидкости.
При втором способе сыворотку крови исследуют под микроскопом, дополнительные вещества не используются. Для получения количественного значения сыворотка многократно разводится, потом направляется под микроскоп, и лаборант регистрирует количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.
Показания к диагностике
Диагностика микрореакции преципитации используется как экспресс-диагностика для выявления случаев заражения в больших группах населения:
Анализ на микрореакцию проводится как контроль над правильностью проводимого лечения, а также дает достоверные данные о выздоровлении пациента.
Показания к проведению анализа
Исследование проводят для выявления возбудителей сифилиса среди больших групп населения. Главной целью анализа является массовость проведения скринингового теста для последующей диагностики в случае положительных результатов.
Кровь на микрореакцию назначают:
Показания к проведению исследования
Ввиду простоты исследования и отсутствия необходимости использования дорогостоящих реагентов, микрореакция преципитации используется для больших групп населения, чаще всего при плановом обследовании.
Сдача анализа назначается:
При лечении для контроля эффективности назначенной терапии исследование проводится несколько раз.
Тест на количественную реакцию показан лицам, у которых обнаружились признаки патологии, детям больных родителей, при язвах на половых органах. Также обследование нужно для подтверждения диагноза после первичных тестов или если пациент имеет другие венерические заболевания.
Забор крови для исследования
Для микрореакции необходимо взять капиллярную кровь, то есть из пальца. Она подвергается центрифугированию, то есть удаляется сгусток из форменных элементов, остается плазма. Дополнительно берут кровь из вены. Если ее невозможно взять, то подойдет спинномозговая жидкость.
Биологический материал отстаивается, плазма или сыворотка смешивается с антигеном. Одновременно с этим идет оценка протекания реакции. Медицинский работник должен следить, появляется ли изменение окраски жидкости.
