качество эмбриона 3вв что значит
Качество эмбрионов при ЭКО
Качество эмбрионов – это ключевой параметр, определяющий успешное прохождение ЭКО. Определение качества производится специалистами-эмбриологами при помощи визуального исследования под микроскопом.
В настоящее время приняты четыре класса качества эмбрионов на стадии дробления (по 3 дня развития)
Данные критерии являются достаточно условными. При определении качества исследуется набор параметров – количество клеток, их расположение, фрагментация, толщина оболочки.
Качество эмбрионов при ЭКО определяется через 48 часов после оплодотворения яйцеклетки. К тому времени должно сформироваться минимум две клетки (оптимально четыре). Через 72 часа клеток должно быть минимум шесть (оптимально восемь). Чем выше качество, тем выше у эмбриона шансы на выживание.
Считается, что эмбрионы отличного и высокого качества имеют высокую вероятность успешной имплантации. При этом необходимо отметить, что существует целый ряд параметров, не поддающихся лабораторным измерениям и существенно влияющих на способность эмбрионов к имплантации.
В клинике «Дети из пробирки» качество эмбрионов определяют специалисты-эмбриологи высшей квалификации. Правильный выбор эмбриона означает максимальную вероятность беременности.
Вся информация носит ознакомительный характер. Если у вас возникли проблемы со здоровьем, то необходима консультация специалиста.
О классификации эмбрионов. Буквы и цифры в обозначении.
Основная задача эмбриолога – выбрать наиболее перспективный по качеству эмбрион! А как оценивают то самое качество?
⠀
В большинстве программ (кроме программ эко с генетическим исследованием эмбрионов) основная оценка происходит по морфологическим признакам эмбриона – внешнему строению. Морфологических признаков много, в основном, ориентируются на количество клеток (должно соответствовать дню развития), степень фрагментации, равномерность дробления.
⠀
День пункции – 0 день! На следующий день эмбриолог смотрит, как прошло оплодотворение – это 1 сутки развития! Об этом будет отдельный пост! ⠀
Далее в норме можно наблюдать такую картину:
Именно цифрой обозначается количество клеток (бластомеров) у эмбриона.Далее после цифры идёт буква – обозначает наличие (степень фрагментацию) или ее полное отсутствие.
Эмбрионы с фрагментацией D не переносят и не замораживают. Буквенно-цифровое обозначение выглядит как 8А, 6В и так далее, А считается лучшим показателем.
⠀
Если говорить о бластоцистах – эмбрионах 5 суток, то их качество оценивается 👉🏻по размеру, качеству внутриклеточной массы (сам эмбрион) и качеству трофэктодермы (клеток, дающим начало хориону, плаценте).
⠀
Здесь цифрами обозначается размер бластоцисты:
Первая буква в аббревиатуре – качество внутриклеточной массы:
Вторая буква в аббревиатуре – качество трофобласта, который даёт начало внезародышевым оболочкам эмбриона:
Соответственно, буквы АА означают лучшее качество.
Морфологическая оценка – это лишь то, что эмбриолог видит глазом! Успех программы зависит от генетического статуса эмбриона, о котором мы можем узнать только по результатам генетического скрининга. Так бывает, что отличный морфологически эмбрион несёт в себе генетические патологии. А иногда эмбрион среднего качества по анализу приходит абсолютно здоровым, который при переносе даёт нормальную беременность!
Автор публикации: наш замечательный эмбриолог – Гридина Анастасия Владимировна!
Эмбрион среднего качества. Однако, шансы на успех все же есть, если этот эмбрион генетически здоров.
Риск хромосомных аномалий зависит в большей степени от возраста, однако среди эмбрионов категории С доля аномальных – выше.
Морфологически – это эмбрион среднего качества. Учитывая ваш возраст, конечно, большее значение имеет генетический статус.
Стадия компактизации – это стадия, предшествующая моруле. Если качество соответствует суткам развития, то шансы конечно есть.
Это хорошее качество.
Качество ниже среднего, риск, что есть хромосомные аномалии – выше, особенно учитывая, что это эмбрионы 7 суток
Статья проверена и одобрена Главным врачём Центра ЭКО «Виталис» Течиевой Жанной Сергеевной
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача!
Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, однако именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
Проведение манипуляций с человеческими эмбрионами, имеющими микроскопические размеры – это сложная область медицины. Поэтому в процессе работы врачи используют сложную терминологию. В данной статье Апрышко Валентина Петровна, заведующая лабораторией эмбриологии одной из московских клиник, расскажет о методах и критериях оценки качества эмбрионов.
Самостоятельно принимать решения, связанные с выбором эмбриона или даты его переноса в матку могут только специалисты-эмбриологи. Однако после прочтения данного материала вы начнете понимать медицинские обозначения типа «8С».
День первый
Сразу после оплодотворения доктор проверяет признаки того, что процедура ИКСИ, ПИКСИ или ЭКО проходит успешно. Для этого он смотрит, как выглядят пронуклеусы, и оценивает их:
Пронуклеусы – это ядра половых клеток (мужских и женских), которые еще не слились. Изучая их вид, можно оценивать перспективы, качество и жизнедеятельность будущих эмбрионов.
На данном этапе развития эмбрионов может формироваться множество патологий, которые ведут к их гибели. Например:
Плохие эмбрионы сразу отбраковывают. Нет смысла их пересаживать. Даже если они не погибают на этапе культивации, организм женщины сам отторгает такие зародыши. В результате если беременность наступает, она очень быстро прерывается. Это происходит уже в первые недели гестации.
День второй
На второй день культивации клетка делится на две. Образуются бластомеры.
Бластоме?ры — клетки эмбрионов на этапе дробления. Оплодотворенная яйцеклетка делится на две дочерние клетки, называемые бластомерами. Каждый бластомер делится на две новые дочерние клетки, которые также получают название бластомеров.
Критериями качества эмбриона на данном этапе являются его:
Чем больше внутри эмбриона бластомеров и чем меньше степень фрагментации, тем более качественным он считается. Такой зародыш имеет большой потенциал к дальнейшему нормальному развитию.
Многие эмбриологи используют классификацию, отражающую качество эмбрионов с помощью четырех букв латинского алфавита. Вот эта классификация:
Также в этой классификации используются цифры, которые отражают количество бластомеров. Чем их больше, тем продукт слияния мужской и женской половых клеток считается лучше. Например, эмбрион «4В» оценивается более высоко, чем «3С». Ведь в нем больше бластомеров и меньше фрагментация.
День третий
Нормальный эмбрион на третий день развития имеет от 7 до 9 бластомеров. Он уже начинает выполнять заложенную в нем генетическую программу.
На данном этапе многие зародыши прекращают свое развитие. Это происходит по причине наличия дефектов генетического материала.
«Блок развития» – так называют эмбриологи явление, которое обеспечивает естественный отбор. Процесс размножения весьма сложен. В ДНК часто случаются поломки. «Поломанные» эмбрионы останавливаются в развитии.
Оценка их качества происходит точно так же, как на второй день. Используется аналогичная классификация. Только бластомеров становится больше. Поэтому описываются они, например, как 8А.
День четвертый
Если бы развитие эмбриона происходило в естественных условиях, он попал бы в полость матки на четвертый день после оплодотворения. До этого времени он находится в маточной трубе.
На четвертый день зародыш состоит из 10-16 бластомеров. Он становится более компактным – занимает небольшой объем относительно количества клеток. Его поверхность выглядит более гладкой, чем на третий день.
Морула – так называется стадия развития эмбриона на данном этапе. В переводе это означает «тутовая ягода». Так эмбриологи назвали его именно за внешнее сходство с этой ягодой.
Заканчивается данная стадия кавитацией. Так называется процесс образования полости внутри эмбриона.
День пятый
На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.
В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:
Именно на этой стадии в большинстве случаев врачи пересаживают эмбрион в матку женщины. Также их можно замораживать. Это делают, чтобы сохранить «лишние» эмбрионы на следующий цикл.
Весь эмбрион окружен блестящей оболочкой. После переноса эта оболочка разрывается. Бластоциста выходит наружу и встраивается в стенку матки. Этот процесс называется hatching, что означает «вылупление».
Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.
На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:
Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.
Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:
Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.
Данный параметр отражается буквами:
Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.
Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:
Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.
Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.
Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.
Оценка качества ооцитов и эмбрионов
Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:
В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.
После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.
Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.
При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.
Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.
Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.
Зрелый ооцит выглядит так
При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.
Что такое качество ооцита
Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.
Ооцит плохого качества, с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.
Оценка оплодотворения в стадии бластоцисты
Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.
Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов. Эмбрион первых суток развития называется зиготой.
На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.
Триплоидный эмбрион (3pn)
Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.
Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития
Начиная со вторых суток эмбрионального развития начинается фаза дробления.
Эмбрион хорошего качества выглядит так.
4-е сутки эмбрионального развития
На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.
На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.
Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.
Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:
Морулы отличного качества
Морула плохого качества
Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.
Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты). Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.
Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы. Буквенные обозначения следует понимать так: наивысшее качество оценивается буквой А, наихудший вариант развития внутриклеточной массы и трофэктодермы обозначается буквой С.
Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.
Этапы ЭКО: оценка качества эмбрионов
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, но именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
В предыдущих публикациях мы говорили о том, на какие этапы делится ЭКО и рассказали о двух из них – стимуляции контролируемой суперовуляции и трансвагинальной пункции фолликулов яичников. На этот раз речь пойдет о важнейшем этапе развития и селекции эмбрионов.
На следующие сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников и оплодотворения яйцеклеток (ооцитов) эмбриолог извлекает чашки и внимательно осматривает яйцеклетки – ищет так называемые пронуклеусы.
Для Homo Sapiens – это 23 хромосомы, включая одну половую. И сперматозоид, и яйцеклетка несут именно по половинчатому набору хромосом. При оплодотворении же происходит их объединение и получается исходный объём генетической информации – 46 хромосом, включая 2 половые.
Яйцеклетка всегда несёт X половую хромосому. Сперматозоид же может нести как Х хромосому, так и Y половую хромосому. При объединении двух X хромосом будущий ребёнок получает женский пол, а при объединении X и Y половых хромосом – мужской.
Соответственно, в ооците на первые сутки после оплодотворения, должно появиться 2 пронуклеоса (1 материнский и 1 отцовский). Но бывает это далеко не всегда, причем независимо от метода оплодотворения. Эмбриолог может находить оба пронуклеоса, только один, больше двух, или ни одного.
Два пронуклеоса – оплодотворение произошло, 0 или 1 пронуклеос – с большей вероятностью нет. Если обнаруживается более 2 пронуклеосов – оплодотворение произошло, но неправильно (возможно яйцеклетка первоначально имела не один набор хромосом, а два, возможно, что два «набора» было в сперматозоиде; кроме того, не исключено, что 2 сперматозоида оплодотворили одну яйцеклетку).
Разберём эти случаи. Два пронуклеоса эмбриолог может не увидеть в первые сутки. Рационально пересмотреть не оплодотворившиеся ооциты на 2-е или 3-и сутки. Нередко бывает, что яйцеклетки, не оплодотворившиеся по данным первого осмотра, демонстрируют признаки оплодотворения или уже дробления (увеличение количества клеток у развивающегося эмбриона) при повторном осмотре на 2-е или 3-и сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников. Эмбрионы же, имеющие 1 или более 2 пронуклеусов могут в дальнейшем развиваться, а могут и нет. Идеальный вариант – наличие в ооците двух пронуклеусов на первые сутки после проведения пункции.
Дальше идет дробление. Эмбриолог за время дробления смотрит эмбрионы дважды: на третьи и на пятые сутки после проведения пункции. В ряде случаев эмбрионы пересматриваются ещё и на вторые и/или шестые сутки.
Как же должны выглядеть эмбрионы на всех этих этапах своего развития? Сначала придётся ввести понятие о классах эмбрионов в зависимости от степени фрагментации, иначе дальше будет сложно.
В порядке увеличения уровня фрагментации: класс А – класс В – класс С – класс D. Эмбрионы с «хорошим» уровнем фрагментации – А и В. На 2-е сутки развития эмбрион, в идеале, состоит из 4 клеток, но количество клеток может варьировать от 2 до 6. 3-и сутки – от 6 до 12 клеток (бластомеров), чаще всего 8. 4-е сутки – от 10 клеток и более.
Эмбрионы, имеющие количество клеток более 10, начинают процесс так называемой «компактизации» – уплотнения бластомеров эмбриона и уменьшение пространства между клетками. Такие эмбрионы называются морулами, и они делятся на классы с 1 по 4 (G1/G2/G3/G4). Самыми «симпатичными» являются G1, а наименее перспективными – G4. И на 5-е сутки развития эмбрион может оставаться морулой. Несмотря на факт отставания в развитии, перенос таких эмбрионов может приводить к наступлению беременности, заканчивающейся рождением здорового ребёнка. Это относится к морулам G1 и G2.
На 5-е сутки эмбрионы состоят уже из более чем 32 клеток (бластомеров) и называются бластоцистами. Они так же делятся на классы от Б1 до Б6. И здесь, в отличие от морул, чем выше класс, тем перспективнее эмбрион. Следом за «цифрой класса» идёт двухбуквенное обозначение. Две заглавных буквы от А до С показывают, в сущности, тоже, что и аналогичные буквенные обозначения у дробящихся эмбрионов 2-3 суток развития. Только одна буква обозначает внутренний слой клеток, а вторая – внешнюю клеточную массу.
Как же выглядят перспективные эмбрионы 5 суток? Есть такое понятие как «эмбрионы хорошего качества» и для 5-х суток развития к ним относятся бластоцисты, начиная с класса Б3ВВ. Значит ли, что остальные эмбрионы бесперспективны? Нет, и морула G1 и бластоциста Б3СС могут приводить к наступлению беременности, и на них не всегда стоит ставить крест. Просто такие случаи относительно редки и эти эмбрионы менее перспективны, нежели тот же Б3ВВ или Б4АВ.
А вот перенос морулы G3 или бластоцисты, имеющей одну или две буквы D в обозначении (Б2СD, Б5DD), вряд ли приведёт к наступлению долгожданной беременности, и от переноса таких эмбрионов рационально воздержаться.
Автор статьи Бендусов Иван Алексеевич, заведующий отделением ЭКО