метод иммуноблот что такое
Метод иммуноблот что такое
Иммуноблот антифосфолипидных антител – иммунологическое исследование, позволяющее в одном лабораторном тесте провести анализ на несколько аутоантител, ассоциированных с развитием антифосфолипидного синдрома.
APS Immunoblotting, Antiphospholipid Antibodies Assay, Western Blot Analysis for the detection of Antiphospholipid Syndrome.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Антифосфолипидный синдром – аутоиммунное заболевание, клинически характеризующееся артериальными и венозными тромбозами, акушерской патологией (прежде всего – привычное невынашивание беременности в I и II триместрах и преждевременные роды), тромбоцитопенией и связанное с циркуляцией в крови антифисфолипидных антител.
Антифосфолипидные антитела не только являются лабораторным маркером АФС, но и играют ведущую роль в патогенезе его клинических проявлений. АФЛА обладают способностью воздействовать на процессы, составляющие основу регуляции системы свертывания крови, сдвигая равновесие в ней в сторону гиперкоагуляции – то есть тромбообразования. Процесс тромбообразования включает взаимодействие АФЛА с фосфолипидами мембран тромбоцитов, эндотелия (клеток, выстилающих изнутри кровеносные сосуды) и связанными с фосфолипидами плазменными белками. При АФС потенциально могут поражаться сосуды любого калибра – от капиллярного русла до крупных артерий, что обуславливает чрезвычайно разнообразный спектр клинических проявлений заболевания.
Антифосфолипидные антитела представляют собой семейство иммуноглобулинов разных классов (IgA, IgM и IgG), которые распознают определенные участки молекул фосфолипидов. Однако, согласно последним исследованиям, выяснилось, что главными мишенями АФЛА являются не сами фосфолипиды, а связывающиеся с ними белки плазмы, так называемые кофакторы. Комплекс кофактор-фосфолипид формирует новую молекулярную последовательность, к которой вырабатываются специфические антитела.
Таким образом, АФЛА реагируют с гетерогенной группой фосфолипидов и белковых антигенов плазмы крови, к которым относятся:
Повышенный риск развития инфаркта миокарда на фоне АФС был подтвержден после обнаружения в спектре АФЛА антител к окисленным липопротеинам низкой плотности, играющих ведущую роль в патогенезе атеросклероза.
Используемые в настоящее время диагностические критерии антифосфолипидного синдрома, принятые в 2006 году в Сиднее, помимо двух клинических параметров (тромбозы и акушерская патология), включают также три лабораторных признака – волчаночный антикоагулянт (определяется в фосфолипид-зависимых тестах на свертывание крови), а также антитела к кардиолипину и антитела к β2-гликопротеину I классов IgM и IgG, определяемые методом иммуноферментного анализа.
Антитела к кардиолипину являются основной фракцией АФЛА, их присутствие обычно ассоциировано с развитием тромбозов и тромбоцитопений. Выявление повышенного титра антител к кардиолипину на фоне клинической картины тромбозов является основанием для постановки диагноза «АФС».
Антитела к β2-гликопротеину I. β2-гликопротеин I – белок сыворотки, обладающий естественной антикоагулянтной активностью. Циркулирующие АФЛА распознают антигенные структуры, формирующиеся при взаимодействии β2-гликопротеина I и кардиолипина. Антитела к кардиолипину и β2-гликопротеину I чаще обнаруживаются у пациентов с первичной формой АФС, а в клинической картине у них преобладают тромбозы глубоких вен и эмболия легочной артерии.
Несмотря на высокую специфичность, применение для диагностики АФС только этих лабораторных критериев не всегда достаточно – тесты могут быть отрицательными при наличии клинических проявлений антифосфолипидного синдрома. Поэтому при наличии у пациента симптомов АФС и отрицательных результатах критериальных лабораторных параметров дополнительно используют определение антител к другим фосфолипидам) и кофакторным белкам.
Антитела к аннексину V. Роль аннексина V особенно важна для предотвращения тромбообразования в сосудах плаценты. Этот блок представлен во многих тканях, но в основном на эндотелиальных клетках и в плаценте. Аннексин V играет роль в предотвращении свертывания крови, конкурируя с протромбином (фактор свертывания крови) за связывание с фосфатидилсерином на оболочке клеток эндотелия и трофобласта. Молекулы аннексина V формируют блокирующий слой, и на поверхности трофобласта не происходит тромбообразования. У больных АФС антитела к этому белку вытесняют его с поверхности эндотелиоцитов и клеток трофобласта, что приводит к тромбозам сосудов плаценты и потере беременности. Антитела к аннексину V чаще выявляют при вторичном антифосфолипидном синдроме (возникающем на фоне других аутоиммунных заболеваний), соответственно, в клинической картине таких пациенток чаще встречается синдром привычного невынашивания беременности.
Антитела к тромбину – один из наиболее чувствительных тестов для диагностики антифосфолипидного синдрома. Наличие этих антител ассоциировано с развитием тромбоэмболических осложнений примерно в 70 % случаев – это самый высокий показатель среди всех маркеров АФС.
Для исследования широкого спектра антифосфолипидных антител используется метод иммунного блотинга. В его основе лежит иммунологическое взаимодействие антитела со специфичным антигеном. Выпускаемые производителем тест-системы для иммуноблота содержат нитроцеллюлозные полоски, на которых фиксированы антигены фосфолипидов и кофакторных белков. На полоску наносят исследуемую сыворотку, при наличии в ней АФЛА они связываются каждый со своим антигеном. Визуализацию образованных иммунных комплексов проводят путем добавления специального фермента и красителя. При наличии в сыворотке антифосфолипидных антител на полоске в зонах, соответствующих отдельным антигенам, появятся окрашенные полосы – так фиксируется положительный результат. Интенсивность окраски полосы можно дополнительно описывать количеством плюсов – это косвенно отражает концентрацию и аффинность (степень сродства) антител.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Что может влиять на результат?
Около 5 % здоровых людей имеют повышенный титр АФЛА, чаще это лица пожилого возраста – с возрастом процент АФЛА-позитивных людей, не страдающих АФС, увеличивается. Частота выявления антифосфолипидных антител увеличивается также у больных воспалительными, аутоиммунными и инфекционными заболеваниями (сифилис, ВИЧ-инфекция, вирусный гепатит С, герпес-вирусная инфекция), злокачественными новообразованиями, а также на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (психотропные средства, оральные контрацептивы). Таким образом, любой из лабораторных признаков при отсутствии клинических симптомов не является достаточным условием для постановки диагноза «АФС».
Помимо первичного антифосфолипидного синдрома, существует также вторичный, возникающий на фоне других заболеваний соединительной ткани. При этом у некоторых пациентов появление признаков АФС может предшествовать появлению симптомов первичного соединительнотканного заболевания (системная красная волчанка, узелковый периартериит, системная склеродермия, ревматоидный артрит). Поэтому при обследовании пациентов с предполагаемым АФС в программу диагностики следует включать определение антинуклеарного фактора в качестве скринингового теста.
Кто назначает исследование?
Гематолог, ревматолог, акушер-гинеколог, ангиохирург, пульмонолог, терапевт, врач общей практики.
Антитела при системной склеродермии, иммуноблот
Тест предназначен для определения антител к ядерным антигенам, используется в диагностике аутоиммунного заболевания – системной склеродермии.
Общая информация.
Аутоиммунные системные заболевания развиваются вследствие неадекватной реакции иммунной системы и продукции антител к собственным тканям и клеткам организма, поэтому характерно поражение многих органов и систем. При системной склеродермии преимущественно вырабатываются антитела к ядерным структурам клетки. Системная склеродермия проявляется поражением кожи и нарушением микроциркуляции органов и систем с дальнейшим развитием фиброза (замещения функциональной ткани соединительной тканью). Чаще поражаются легкие, пищевод, сердце и почки с развитием необратимых изменений при отсутствии лечения. Отдельно выделяют ограниченную форму системной склеродермии, когда поражается только кожа, что проявляется в виде утолщения кожи и подкожной клетчатки с нарушением подвижности в суставах.
Иммуноблот является подтверждающим тестом системной склеродермии при положительном результате антинуклеарного фактора на клеточной линии. Выявление антинуклеарных антител возможно при других аутоиммунных заболеваниях. Отрицательный результат не исключает системной склеродермии, при наличии симптомов, исследование должно быть продолжено.
С какой целью назначается исследование?
Как выполняется исследование?
ИФА, метод иммуноблоттинга
Как расшифровать результат иммуноблота?
Вариант нормы: антитела не обнаружены (отрицательный)
Формат выдачи результата – полуколичественный (в крестах) по каждому антигену отдельно. Результат может быть отрицательным (антитела не обнаружены), сомнительным (+), положительным (+++) и с выраженным количеством антител (++++).
Что означает выявление антител к каждому антигену (белку)?
Антитела (а/т) к белку топоизомеразе (Scl-70) – Выявляется при диффузных формах склеродермии, при поражении кожи и внутренних органов
А/т к к белкам центромер (CENТ A и CENT B) – являются главным диагностическим критерием CREST синдрома. Возможно их выявление при фиброзе легких и других аутоиммунных болезнях.
А/т к РНК полимеразам (RP11 и RP155) – показатель тяжелого течения с поражением внутренних органов
А/т к белкам фибриллярин и NOR90– достаточно точные маркеры системной склеродермии с поражением внутренних органов. Данные антитела обеспечивают ядрышковый тип свечения при исследовании антинуклеарного фактора.
А/т к Pm-Scl100, Pm-Scl75 – антитела, выявляемые при склеродермии и полимиозите (перекрестные). Определяются при поражении кожи, суставов, пищевода. Чаще встречаются в детском возрасте
А/т к Ku – перекрестные антитела при системной склеродермии и полимиозите, часто встречаются при поражении легких, других аутоиммунных процессах
А/т к PDGFR (тромбоцитарный фактор роста) – точный критерий системной склеродермии, встречается очень редко
А/т к Ro-52 (SSA-A 52 кДа) – неспецифичны, встречаются при многих системных заболеваниях
Возможно изолированное выявление антител или сочетанное (чаще). Результат интерпретируется лечащим врачом при анализе клиники, данных инструментальных и других лабораторных методов исследования.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Сдаётся венозная кровь, допускается взятие биоматериала в течение дня через 3 часа после приёма пищи, воду пить в обычном режиме.
Иммуноблот антител IgG и IgM к боррелиям (14 антигенов)
Описание
Синонимы (rus): Нейроберрелиоз, боррелиоз
Синонимы (eng): Neuroborreliosis
Биоматериал: Венозная кровь
Показатель(и): Антитела к p18, p19, p20, p21, p58,OspC (p25), p39, p41, p83, LBb, LBa,VlsE Bg, VlsE Bb, VlsE Ba
Метод(и): Метод иммуноблота
Тип контейнера и особенности преаналитики: Биохимическая пробирка с активатором свертывания,6 мл (красная или коричневая крышечка)
Данное исследование выявляет антитела к 14 антигенам Borrelia afzelii (Ba), Borrelia garinii (Bg) и Borrelia burgdorferi sensu stricto (Bb), что позволяет не только подтверждать диагноз боррелиоза, но также и определять стадию болезни, тип возбудителя и оценить ответ на проводимую терапию. В связи с персистенцией возбудителя, во многих случаях иммунологический ответ не подчиняется классическим законам IgM–IgG перехода, поэтому даже в хронических стадиях заболевания могут преобладать антител класса IgM. В связи с этим, рекомендуется проводить тестирование антител к боррелиям класса IgG и IgM. При подозрении на нейроборрелиоз рекомендуется исследование интратекальной продукции антител к Borrelia burgdorferi.
Когда назначается
Диагностика и дифференциальная диагностика причин миелитов, невритов, энцефалитов, менингитов.
Подготовка к анализу
Специальной подготовки не требуется. Исследование проводится натощак (не принимать пищу 3 часа до исследования, можно пить воду).
Интерпретация
Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С (иммуноблот)
Описание
Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С (иммуноблот) — подтверждение положительных результатов скрининговых тестов на наличие антител к вирусу гепатита С.
Гепатит С — наиболее тяжёлая форма вирусного заболевания, которое поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).
Клиническая картина при гепатите С
Основные клинические проявления гепатита С очень неспецифичны: слабость, утомляемость, тошнота, отсутствие аппетита, потеря веса; при циррозе печени может появиться желтуха. Как правило, гепатит С протекает бессимптомно и в большинстве случаев диагностируется случайно. Гепатит C может вызвать как острую, так и хроническую инфекцию гепатита, которая влечет серьёзное пожизненное заболевание. Особо тяжёлый исход хронического гепатита С — цирроз печени и гепато-целлюлярная карцинома.
В норме антитела к вирусу гепатита С в крови отсутствуют.
Подтверждающий тест позволяет выполнять раздельную оценку наличия специфических IgG антител к различным антигенам вируса гепатита С (структурным нуклеокапсидным: Cor-1 и Cor-2 и неструктурным: хеликаза, NS3, NS4, NS5). Используется в качестве подтверждающего исследования для уточнения неясных результатов скрининговых ИФА тестов, направленных на суммарную оценку наличия антител к вирусу гепатита С.
Подтвердить результаты определения антител скрининговых ИФА-тестов помогает высокоспецифичное развёрнутое исследование антител методом иммуноблота, которое позволяет не только выявить, но также и идентифицировать антитела, направленные против определённых структурных и неструктурных компонентов вируса гепатита С, имеющих разную значимость.
Как и ИФА-тесты, этот метод информативен, в среднем, начиная с 3–4 недели инфекции — период появления в крови специфических антител.
Показания
Подтверждение положительных или сомнительных результатов, полученных при скрининговом исследовании антител к вирусу гепатита С.
Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.
Интерпретация результатов
Способ представления результата: на бланке результата отражен результат выявления антител к используемым антигенам, раздельно для Cor-1 и Cor-2, хеликазы, NS3, NS4, NS5 (отрицательный/сомнительный/положительный). Выдаётся общее заключение, сделанное на основании комплексной оценки результатов.
Отрицательный результат иммуноблота: человек не был инфицирован вирусом гепатита С (результат скрининговых ИФА тестов — ложноположительный).
Положительный результат иммуноблота: была инфекция вирусом гепатита С.
Сомнительный результат: возможно, была инфекция вирусом гепатита С.
Профилактика ВИЧ-инфекции
В Центре регулярно осуществляется консультирование как ВИЧ-позитивных пациентов, так и их родственников по вопросам санитарно-гигиенического поведения в семье и вопросам профилактики в семье (возможных контактов с кровью и биологическими жидкостями).
• Если у Вас нет ВИЧ-инфекции, но ваше поведение связано с риском заражения, изменив его Вы, избежите инфицирования в будущем.
• Если Вы и Ваш партнер дискордантная пара (где один партнер ВИЧ+, а другой ВИЧ-), то знание собственного статуса и статуса партнера поможет Вам договориться о безопасном сексуальном поведении и позволит Вам иметь здоровых детей.
• Знание своего ВИЧ-статуса беременной женщине позволяет значительно снизить риск передачи вируса ребенку.
• Если Вы живете с ВИЧ, Вы защищаете от заражения других людей. Чем раньше проведено обследование и начато лечение, тем больше шансов сохранить здоровье.
• Современное лечение ВИЧ-инфекции доступно в России и представляется бесплатно.
Если у вас ВИЧ, попытайтесь поддерживать себя в хорошей физической форме. Для этого необходимо:
• Пользоваться диетой, включающей богатую протеинами, витаминами и углеводами пищу. Ваше тело нуждается в пище для того, чтобы развиваться, получать энергию и защищаться от инфекции.
• По возможности поддерживать активность для того, чтобы оставаться в форме, поддерживать режим сна и бодрствования. Физические упражнения помогают избежать депрессии и волнений и вносят вклад в общее ощущение благосостояния, а также сопутствуют поддержанию общего тонуса и сопротивляемости организма.
• По возможности продолжать работать.
• Заниматься имеющим смысл или по крайней мере отвлекающим делом.
• Общаться с семьей и друзьями.
• Говорить с кем-нибудь о болезни и диагнозе.
• Использовать презервативы, занимаясь сексом.
• Обращаться за помощью по медицинским проблемам, следовать советам относительно ухода, включая советы социальных и консультирующих служб.
• Снижать или избегать стрессов, определяя потенциальные или существенные их факторы.
• Обо всех изменениях в состоянии здоровья, ухудшении самочувствия сообщайте своему лечащему врачу. Регулярное медицинское наблюдение и, при необходимости, специфическое лечение – это то, что поможет Вам вести полноценный образ жизни долгие годы.
Каждый пятый в России не знает о своем диагнозе. Мы настоятельно рекомендуем регулярно проходить тестирование на ВИЧ. Каждый уважающий себя человек должен знать свой ВИЧ-статус. Этот тест должен стать таким же рутинным, обычным, как например, общий анализ крови. Жители РФ имеют право на бесплатное тестирование на ВИЧ в поликлиниках по месту жительства, в кабинетах анонимного тестирования и консультирования или в Центрах по профилактике и борьбе со СПИДом.
В Московской области адреса кабинетов тестирования представлены на сайте областного Центра СПИД.
Необходимо помнить, что образование антител к ВИЧ в организме человека происходит постепенно, существует так называемый период «серонегативного окна», который в среднем составляет до 3 мес. То есть при стандартном методе тестирования сразу после заражения антитела могут не определиться. Этот момент необходимо помнить и, в зависимости от степени рискового поведения, повторить тестирование 1 раз в 3 месяца, 1 раз в 6 месяцев.
Основным методом выявления ВИЧ-инфекции является проведение тестирования на антитела к ВИЧ. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию (в том числе и анонимное) осуществляется в медицинских учреждениях всех форм собственности с информированного согласия пациента в условиях строгой конфиденциальности, а в случае обследования несовершеннолетних в возрасте до 14 лет – по просьбе или с согласия его законного представителя. Тестирование добровольное и проводится с обязательным до- и послетестовым консуль¬тированием по вопросам профилактики ВИЧ-инфекции.
• Доноры крови и (или) ее компонентов, биологических жидкостей, органов и тканей – при каждом взятии донорского материала;
• Работники отдельных профессий, производств, предприятий, учреждений и организаций-при проведении обязательных предварительных при поступлении на работу и периодических медицинских осмотров, к ним относятся:
Врачи, средний и младший медицинский персонал лабораторий (группы персонала лабораторий), которые осуществляют обследование населения на ВИЧ-инфекцию и исследование крови и биологических материалов, полученных от лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека;
Медицинские работники в стационарах (отделениях) хирургического профиля при поступлении на работу и в дальнейшем 1 раз в год;
• Лица, проходящие военную службу и поступающие в военные учебные заведения и на военную службу по призыву и контракту, при призыве на срочную военную службу, при поступлении на службу по контракту, при поступлении в военные ВУЗы министерств и ведомств, устанавливающих ограничения для приёма на службу лиц с ВИЧ-инфекцией;
• Иностранные граждане и лица без гражданства при обращении за получением разрешения на гражданство или видом на жительство, или разрешением на работу в Российской Федерации, при въезде на территорию Российской Федерации иностранных граждан на срок более 3-х месяцев.
• Мужья, половые партнеры всех женщин, поставленных на учет по беременности
• Дети, рожденные матерями, не обследованными на ВИЧ во время беременности и дети, рожденные ВИЧ-инфицированными матерями и/или получавшие грудное вскармливание от ВИЧ-инфицированной женщины.
• Лица, употреблявшие психоактивные вещества.
• Внутренние трудовые мигранты, включая работающих вахтовым методом.
• Лица, находящиеся в местах лишения свободы.
• Пациенты с рядом клинических показаний, указывающих на наличие ВИЧ.
• Пациенты с подозрением или подтвержденным диагнозом: наркомании, инфекций, передаваемых половым путем, гепатита В, С, легочного и внелегочного туберкулеза.
• Уязвимые группы населения: гомо- и бисексуалы, работники коммерческого секса, клиенты работников коммерческого секса, лица с беспорядочными половыми связями (промискуитет), лица, находящиеся в местах лишения свободы.
• Реципиенты препаратов крови.
• Лица, имеющие половые контакты с ВИЧ-инфицированными или больными инфекциями, передающимися половым путем.
• Работники системы здравоохранения, получившие микротравмы при выполнении профессиональных обязанностей.
• Пациенты, при оказании помощи которым был травмирован медицинский работник.
• Члены семей ВИЧ-инфицированных пациентов.
ПОМНИТЕ: Согласие или отказ от тестирования на ВИЧ не должны влиять на качество оказания медицинской помощи.
• Положительный результат теста означает, что у человека обнаружены антитела к ВИЧ. Это дает основание полагать, что человек ВИЧ-инфицирован. Необходима консультация врача.
• Отрицательный результат теста означает, что антитела к ВИЧ не обнаружены. Однако отрицательный результат тестирования на антитела к ВИЧ не всегда может означать, что человек не инфицирован, поскольку существует период «серонегативного окна». Чтобы выработать антитела в количестве, достаточном для их обнаружения тест-системой организму требуется от двух недель до трех месяцев (в редких случаях до года). Этот отрезок времени называется «период окна». Тестирование в этот период может дать отрицательный результат, поэтому анализ следует повторить. В «период окна» кровь, сперма, вагинальный секрет и грудное молоко инфицированного человека уже содержат достаточное количество вируса для заражения других людей.
• Неопределенный (сомнительный) результат теста: необходимо провести повторные исследования на антитела к ВИЧ иммунном или линейном блоте через 2 недели, 3 и 6 месяцев. Если получены отрицательные результаты в ИФА, то дальнейшее исследование не требуется. Если через 6 месяцев после первого обследования вновь будут получены неопределенные результаты, а у пациента не будут выявлены факторы риска заражения и клинические симптомы ВИЧ-инфекции, результат расценивается как ложноположительный. При этом при наличии эпидемиологических и клинических показаний исследования проводятся повторно по назначению лечащего врача или эпидемиолога. Пока окончательный результат тестирования на ВИЧ неизвестен рекомендации в отношении изменения поведения такие же, как и для лиц с положительным результатом тестирования.
Результаты исследования не сообщаются по телефону, а только при личной беседе с обследуемым.
Скрининговые и подтверждающие тесты. Иммуноблоттинг, ИФА и ПЦР. Точность экспресс-тестов и адреса для анонимного тестирования.
У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо каждому!
Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов.
Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.
ИФА (иммуноферментый анализ).
Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.
Существует несколько поколений ИФА:
• В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
• ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
• Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.
Современный ИФА четвертого поколения позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день). Он проводит комбинированный анализ, одновременно проверяя: есть ли в крови белковые «обломки» ВИЧ (антигены), а также антитела.
За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.
Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.
Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).
ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).
Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.
А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?
Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.
ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:
• может обнаружить только ВИЧ-1;
• в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например, у человека есть подозрение на острую ВИЧ-инфекцию (высокий риск инфицирования) или в период серологического окна;
• новорожденным от ВИЧ-положительных матерей
Как тогда правильно проверяться на ВИЧ?
Согласно рекомендациям Минздрава, первоначальным анализом должен быть скрининговый тест ИФА. Если результат оказывается положительным, то в лаборатории, используя тот же образец крови, делают еще один анализ. Если и он «с плюсом», то тогда уже проводят иммуноблот.
Нужно ли повторно тестироваться, если результат анализа отрицательный?
Универсальной рекомендации, увы, нет. Повторные тесты нужны чтобы застраховаться от попадания в период окна, когда в крови еще нет антител и антигенов ВИЧ, а вирус уже проник в организм.
Анализ на ВИЧ может дать неправильные результаты в следующих случаях:
• при наличии системных аутоиммунных заболеваний (коллагенозов, васкулитов) и злокачественных опухолей;
• при тестировании в период серологического окна — когда в крови еще не появились антитела к ВИЧ;
• из-за ошибки при проведении теста в лаборатории;
• после вакцинации от гриппа.
У детей, рожденных от ВИЧ-положительных матерей, до восемнадцатимесячного возраста в крови могут сохраняться материнские антитела, что может приводить к ложноположительным результатам.
На результаты теста не влияют прием пищи и алкоголя или курение. Специальной подготовки перед сдачей анализов на ВИЧ не требуется.
А что с экспресс-тестами?
Они позволяют провериться на ВИЧ, не посещая лабораторию или поликлинику. По сути, это тесты ИФА третьего поколения, которые определяют антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в слюне, моче или крови.
Их рекомендуют делать через три месяца после возможного риска инфицирования (чтобы избежать попадания в «окно»). Но считаются достоверными они с 30-го дня предполагаемого заражения (период появления антител).
Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.
Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.
Важно помнить! Если такой тест оказался положительным, результат необходимо как можно быстрее перепроверить более точным методом.
Можно пойти в Московский областной СПИД-центр (ул. Щепкина, 61/2, корп.8)., кабинеты анонимного консультирования или в некоммерческие организации (например, фонд «СПИД.ЦЕНТР» Адрес: ул. Нижняя Сыромятническая д. 11 к 1, офис 313).
Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.
Государственное казенное учреждение здравоохранения Московской области «Центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями»
Адрес: 129110, Москва, ул. Щепкина 61/2 корпус 8